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組培法快速繁殖優(yōu)質草花
創(chuàng)建園林化城市是現代城市園林建設發(fā)展的方向，而科學技術的研究、應用在城市園林綠化可持續(xù)發(fā)展中無疑具有先導作用。植物組織培養(yǎng)技術是將植物體的某一部分器官、組織、細胞等在離體條件下通過人工無菌培養(yǎng)的方式來進行快速繁殖。這項技術目前在很多園林植物上得到了應用，據有關資料統(tǒng)計，植物組織培養(yǎng)技術已滲入到花卉園藝植物的80個科、450多種植物。其應用范圍之廣，主要是它具有其它繁殖技術無法比擬的優(yōu)點，如保存脫毒種苗，維持雜交F1代優(yōu)良性狀，生長周期短，全年試驗、生產，不受氣候影響等。因此世界各國花卉產業(yè)都將組培作為一種大規(guī)模工廠化生產的手段來應用。近兩年，西安市園林研究所承擔了市中心鐘、鼓樓廣場等城市主要街景的節(jié)日布置工作，草花需量大增。草花在園林景觀中是很重要的綠化材料，它具有品種繁多，色彩豐富，花期錯落及可調控、見效快的特點。盆栽草花可以用來裝飾會場、廳堂、節(jié)日擺放等；露地栽培的草花主要用來布置花壇、花境、花帶等；它能與喬、灌木、草坪配合構成園林綠化復層結構，豐富園林景觀。但經過兩年的觀察，我們發(fā)現不少品種草花退化嚴重，達不到應有的美化觀賞效果。雖然從國外引進少量優(yōu)質品種，但價格昂貴，出苗率低，而且多為雜交一代種子，即使收獲到種子也極易變異。在這種情況下，運用植物組織培養(yǎng)技術對優(yōu)良品種進行快速繁殖，既可保持優(yōu)良品質不變，又可在短期內獲得大量種苗的優(yōu)勢也就體現了出來。
西安市園林研究所于80年代中期建立起植物組織培養(yǎng)室，完成了郁金香組織培養(yǎng)技術的課題研究，但由于當時科研政策等因素制約，使該項組培技術未能發(fā)揮它應有的社會和生產效益。以后十幾年中，由于種種原因，組培的研究應用工作一直處于停滯狀態(tài)。1998年，由西安市建委立項，委托西安市園林研究所開展“利用植物組織培養(yǎng)技術快速繁殖優(yōu)良草花品種”的課題研究及應用工作。該課題于1998年4月正式啟動，在一年多的時間里，通過課題主持人及參加人員的共同努力，有了階段性突破。從實驗研究順利過渡到生產階段，現已有8000成品苗開花，點綴在城市主要街景、小區(qū)等處，可為西安市提供2-3萬盆組培繁殖的各種草花。我們于1998年9月選定以大花萬壽菊、矮牽牛、百日草三種花為組培快速繁殖的對象。萬壽菊原產于南美墨西哥等地，為一年生草本植物，喜溫暖環(huán)境，不耐寒，喜溫熱，雜交一代大花萬壽菊具有花大、色艷、花期長、擺放效果十分壯觀，對環(huán)境的適應性較強。矮牽牛原產南美州，性喜溫暖，不耐霜凍，又不耐30℃以上的高溫，株體高度一致，差異微小，擺放效果好，花色鮮艷、優(yōu)美整齊，但種子出苗率很低，價格昂貴。
以萬壽菊為例，其組培繁殖過程如下：
一、植物名稱
雜交一代大花萬壽菊。金黃色“大頭娃”，桔黃色“發(fā)現”兩個品種。
二、培養(yǎng)途徑
1、以葉片或葉柄為外植體，通過脫分化產生愈傷組織，再進行分化產生不定芽，由不定芽生成小苗的方式進行快速繁殖。這種方法繼代速度快，經過一次脫分化和再分化的過程，在短期內可獲得大量苗子，但經實驗觀察后用這種方法繁殖植株變異率較高。
2、不經過愈傷組織，而是通過側芽和頂芽在激素作用下抑制頂端優(yōu)勢，促進側芽生長，生成小苗進行快速繁殖。經觀察這種方法由于生長點側芽數目有限，速度不如第一種快，但這種方法獲得的小苗能保持母本的優(yōu)良性狀，幾乎無變異發(fā)生。所以，我們選定用這種方法進行快速繁殖。
三、無菌培養(yǎng)的建立
選用幼嫩的帶側芽的莖段或頂芽做培養(yǎng)的外植體，接種前先用自來水沖洗2-3遍，然后用肥皂水洗一遍，再用自來水沖5-10分鐘。在無菌條件下，用2%的NaCIO消毒液消毒20分鐘，再用無菌水沖洗3-4次。然后將莖段切成1-1.5cm的帶有一對側芽的小段，頂芽切成0.5cm的芽，接種在經高壓滅菌的固體MS培養(yǎng)基上(PH5.8-6.0)。置于25℃左右的培養(yǎng)室內，光照時間為12小時，光照強度為300lux。
四、側芽的誘導和生長
當無菌培養(yǎng)建立以后，便進行側芽誘導和促其生長繁殖的試驗，用30種不同激素的配比經上述試驗、記錄、觀察、比較后進行篩選，確定出適合誘導和生長的培養(yǎng)基，以下列舉幾個有代表性的不同配比的培養(yǎng)基進行說明:(略)
從上表可以看出，Ⅱ、Ⅲ組，不但側芽萌動快，而且生長良好，側芽健壯。經過比較確定了MS+6BA1+NAA0005為最適合的繼代培養(yǎng)基，在此培養(yǎng)基上生長，愈傷組織少，側芽20天至1個月后可以長至4-5cm左右，成為帶6-8片葉的健壯無根苗。同時，基部分化的小苗為4-6個，反復利用莖切段，可不斷增殖。
五、生根培養(yǎng)
經過篩選，確定MS培養(yǎng)基(不加任何激素)即可以進行壯苗及生根培養(yǎng)。若加少量NAA，雖生根迅速，但易徒長，造成細高苗，不利以后移栽。將上述無根壯苗轉MS培養(yǎng)基進行根誘導，一般2-3周即可長出潔白的正常根系，根長到2-3cm即可移栽。若根太長，移苗時易傷根、爛根；若根太短，則影響水份和營養(yǎng)吸收，而不易生長。
六、試管苗出瓶與苗期管理
經過上述幾個階段的培養(yǎng)，小苗已生根成為完整的再生植株，這時便可出瓶移栽。移栽前最好打開瓶塞放在陽光充足，溫度接近自然溫度的地方鍛煉1-2天，然后取出幼苗，用自來水將根部的瓊脂沖洗干凈，再移栽到合適的基質中。我們選用的基質主要是木屑與園土的混合物。先將苗床用1%托布津消毒，上面鋪20cm左右的園土，將園土澆透水，上面再鋪10cm左右的木屑土，先不澆水，這時將幼苗移植在木屑土上，操作要小心，勿傷苗，以免引起病害。移植完畢，用噴霧器將表面噴透，然后用塑料薄膜覆蓋，保持濕度在90%以上，溫度20-30℃，防止太陽直射。一個星期后，可逐步揭開塑料膜，適量澆水，并施以少量稀肥水，以利幼苗迅速生長，增強抵抗力，便于進一步移栽到大田或上盆，一般照此法移栽成活率在80%以上，生長較粗壯的植株成活率可達95%。1999年5月底，經過上述組培繁殖的第一批大花萬壽菊開花，花形好，花色鮮艷，保持了原來親本的的優(yōu)良性狀。今后，我們計劃繼續(xù)就萬壽菊、矮牽牛等幾個優(yōu)良品系的草花進行大量組培繁殖，同時將鳳梨、紅掌等高檔盆花進行組培試驗及應用生產。
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