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花卉無性系的快速繁殖
2008/6/1 11:55:59
較高的增殖倍數(shù)、較短的增殖周期和周年生產(chǎn)構(gòu)成了快速繁殖的高效率,省時、省工、節(jié)約土地是其另一優(yōu)點,針對目前花卉快速繁殖中操作人員理論知識與實踐不能很好結(jié)合導(dǎo)致種苗成活率降低的現(xiàn)狀,現(xiàn)以理論、實踐相結(jié)合的方式,從品種選擇開始至種苗銷售進(jìn)行總結(jié),以期更好地為業(yè)內(nèi)人士提供幫助。
第一階段:品種選育與外植體選擇新品種引進(jìn)與自行育種是相輔相成的兩條路徑,經(jīng)過幾年實踐經(jīng)驗,本人認(rèn)為作為種苗生產(chǎn)公司應(yīng)采取引進(jìn)為主、自行小量育種為輔的策略。針對快速繁殖來說,無論以哪種方式繁殖,我們以得到表現(xiàn)優(yōu)秀、性狀突出的花卉植株為目的,以期待其作為外植體生產(chǎn)優(yōu)秀種苗。
本人在紅掌、非洲菊、蝴蝶蘭三個品種上均進(jìn)行了以雜交育種為主,離子束照射、轉(zhuǎn)基因為輔的品種選育嘗試,但除了在非洲菊上有2至3個表現(xiàn)較好的單株應(yīng)用于生產(chǎn)外,其他方面均無很好的表現(xiàn)型出現(xiàn),紅掌、蝴蝶蘭育種周期長很大程度上制約了選育進(jìn)程。在育種過程中首先要依據(jù)播種計劃確定授粉日期,在授粉時對優(yōu)選出的單株性狀進(jìn)行定性、定量描述、照相,授粉后經(jīng)常觀察花朵、果實、種子長勢,準(zhǔn)確把握播種日期,以免果實過度成熟開裂造成表面消毒上的困難。注意對母株的保存及對后代的優(yōu)良性狀單株的保存,對于表現(xiàn)出眾的單株,可用組培方式先生產(chǎn)部分種苗,進(jìn)入中間實驗階段。
當(dāng)我們拿到表現(xiàn)優(yōu)秀的單株后,就要進(jìn)入快繁的第一步———
外植體的選擇。組織培養(yǎng)上所說的外植體簡單來說就是指采來組培的葉、芽、根、莖等植株的一部分。在外植體選擇方面,應(yīng)首先考慮植物種類,因為不同植物種類有不同的無性繁殖能力,通常木本植物及較大的草本植物較難繁殖,一些草本植物比較容易繁殖;其次,我們要重點考慮外植體的大小,過大外植體易于污染,過小外植體成活率低;再次,我們要考慮外植體的來源,不同的來源對應(yīng)著不同的激素用量,包括不同的個體、不同的器官或器官上的一定部位,尤其是一些較難培養(yǎng)的種類,需要仔細(xì)考慮外植體的來源;最后,我們要考慮外植體生理學(xué)上的年齡,其影響到后面的形態(tài)發(fā)生類型,按植物生理學(xué)的觀點來說,沿植物體的主莖來說,越向上的部位越易形成花器官。一般情況下,幼年的組織都比老年的組織具有更高的形態(tài)發(fā)生能力。在日常實踐中,我們還要注意外植體的栽培環(huán)境(溫室內(nèi)或大田栽培)、取材之日前后天氣狀況、前次澆水、施肥情況等。采用不適宜的外植體在限定的條件下,可能會使培養(yǎng)失敗。
第二階段:初代培養(yǎng)階段1.外植體的表面滅菌在采樣前應(yīng)預(yù)先制備并滅菌好用于初代接種的培養(yǎng)基,攜帶刀、剪、廣口瓶,到栽培場所選取潔凈、無病蟲傷害的健壯植株,摘取比較幼嫩、生長能力強的部位,注意,過嫩部分會難以承受表面滅菌。
若大田內(nèi)材料污染過于嚴(yán)重,可將其單獨挖出盆栽管理,噴、灌殺菌、殺蟲劑,不便移栽的,可套塑料袋,隔離灰塵和昆蟲。
初代接種材料直接來自溫室或田間,我們要獲得有活力的材料,第一次滅菌措施不可能很徹底,污染率一般在30%至75%,嚴(yán)重時達(dá)100%,實踐表明,用試管之類的小容器應(yīng)盡量分散、互相隔離,效果較好。
2.誘導(dǎo)外植體生長與分化從理論上,我們應(yīng)認(rèn)識植物再生的四個途徑,然后在誘導(dǎo)之初就應(yīng)當(dāng)確定選擇哪種途徑。
。1)頂芽與腋芽發(fā)育途徑與大田栽培不同,在無菌培養(yǎng)中,單個的芽不僅可以長大,而且還會出現(xiàn)長出多個芽的情況,芽逐漸長成枝條,枝條上再長出小芽,把小芽切下,使之萌發(fā)出新的枝條,重復(fù)這種“芽———枝條”的過程,便會取得大量繁殖的效果。
此種途徑中最常見的便是常說的微型扦插與莖尖脫毒兩種,舉例來說,葡萄、紅葉石楠的繁殖就是采用微型扦插的途徑;莖尖脫毒一般在馬鈴薯上應(yīng)用廣泛,但針對花卉來說,有些獨特的花色是由病毒引起的,通過莖尖培養(yǎng)可能使病毒脫除,以致失去觀賞價值,此種表現(xiàn)在天竺葵某些品種上已被證實。
。2)不定芽發(fā)育途徑不定芽途徑多從誘導(dǎo)外植體產(chǎn)生愈傷組織開始,而后從愈傷組織上分化出芽,這其中又分為兩種類型,即器官發(fā)生型的再生方式(愈傷組織旺盛生長型)與器官型的再生方式(較少愈傷組織型)。旺盛生長型最合適的代表就是國內(nèi)多數(shù)廠家用葉片作為外植體生產(chǎn)出來的紅掌,基本上是通過愈傷組織的增殖而得到苗子,從而進(jìn)行增殖的。較少愈傷組織型如常見的非洲菊,在非洲菊表面幾乎不生長愈傷組織,不定芽就從其短莖四周分化出來,愈傷組織途徑容易產(chǎn)生變異是眾所周知的事情,這也是生產(chǎn)中紅掌變異率高于非洲菊的理論基礎(chǔ)。
我們應(yīng)當(dāng)認(rèn)識到,不定芽途徑普遍經(jīng)歷著我們常說的脫分化與再分化過程,因此,諸如非洲菊之類的較少愈傷組織型并非毫無變異,其可能通過長期的積累在后代表現(xiàn)出來。
同時,通過不定芽途徑可使嵌合體發(fā)生性狀分離,這在我們?nèi)粘5幕ɑ苌a(chǎn)中必須引起重視,最常見的如金邊黃楊、金邊巴西鐵樹等,經(jīng)不定芽途徑繁殖后,金邊消失。
。3)體細(xì)胞胚狀體發(fā)生途徑胚狀體是組織培養(yǎng)上的專用術(shù)語,是由體細(xì)胞形成的,類似于合子胚發(fā)育過程的發(fā)生途徑,一般經(jīng)歷球形、心形、魚雷形、子葉形的胚胎發(fā)育時期。蝴蝶蘭的無菌播種實際上是合子胚發(fā)生途徑,但由于其過程相似,從中我們可以理解體細(xì)胞胚狀體的發(fā)育過程。與其他途徑區(qū)別之處在于,一方面胚狀體在發(fā)育早期就有了明顯的根端與苗段的分化,換句話說,應(yīng)該可以在一種培養(yǎng)基上長苗、生根。另一方面,由胚狀體發(fā)育來的小植株彼此之間互不粘連,換句話說,我們在接種過程中只用鑷子不用刀便可以輕易將其分離。
總體上說,由于體細(xì)胞胚狀體發(fā)生途徑的過程復(fù)雜,理論研究尚未深入,在整個組培領(lǐng)域應(yīng)用范圍較小,因此還需對胚狀體的各個發(fā)育時期有更為深入的理論探討。
。4)原球莖發(fā)育途徑這種途徑的突出代表就是蝴蝶蘭組培苗的生產(chǎn),原球莖與種子的不同之處在于生長初期并不出現(xiàn)胚根,只是胚逐漸膨大,之后種皮的一端破裂,漲大的胚呈小圓錐形。蝴蝶蘭生產(chǎn)上一般用頂芽或側(cè)芽或根誘導(dǎo)出原球莖,而后,通過原球莖增殖,等達(dá)到需要數(shù)量時,換培養(yǎng)基使其長苗、生根。
以上介紹的四種途徑,基本包括了目前可再生的所有植物,但是,我們不能用孤立的眼光看待它們,因為本身在生產(chǎn)實踐中,這幾種方式往往結(jié)合在一起應(yīng)用,我們可以根據(jù)目的綜合利用,只是在培養(yǎng)之初,我們要定下一個主要途徑,然后按照目標(biāo)努力實驗。
第三階段:增殖培養(yǎng)階段一般情況下,在第二階段通過各種方式得到的芽、苗、胚狀體、原球莖數(shù)量不能滿足大量生產(chǎn)的要求,需要進(jìn)一步培養(yǎng)增殖,這就進(jìn)入我們通常所說的增殖階段。其實在誘導(dǎo)階段介紹中已經(jīng)說出了各種類型的增殖方法,以上面提到的幾種產(chǎn)品為例,非洲菊主要通過不定芽增殖,倍數(shù)以控制在3至5倍為宜。通過將紅掌愈傷組織切塊,同時伴隨著愈傷組織上的小芽長成3至5厘米小苗,在分離愈傷組織的同時將達(dá)到要求高度的小苗轉(zhuǎn)入生根,倍數(shù)一般控制在2至4倍。蝴蝶蘭實生苗是簡單的分離,因其每顆苗之間并無粘連,不過在轉(zhuǎn)瓶過程中要淘汰部分小苗。紅葉石楠、泡桐、葡萄實際是不定芽與微型扦插的結(jié)合體,兩種方式得到的苗都可以用,實際應(yīng)用中的倍數(shù)一般控制在6倍左右。
需要知道的是,誘導(dǎo)階段并不是必須的,但增殖階段是必作的,例如我們給別人代繁種苗時,一般接受的是其提供的瓶苗,然后只做增殖及生根即可。同時我們也要提前計劃好在增殖初期預(yù)留儲備“母瓶”,母瓶可放置在10℃至15℃的低溫下,延緩繼代周期,隨時調(diào)用。
第四階段:生根培養(yǎng)階段當(dāng)繁殖材料達(dá)到一定量后,需要對其中一部分繼續(xù)增殖,另外一部分生根,這就進(jìn)入了通常所說的生根階段。
應(yīng)當(dāng)知道,經(jīng)歷生根階段的目的是為了成功移植到試管外的環(huán)境做準(zhǔn)備,通常要配合減少糖量及提高光照等手段為瓶苗適應(yīng)外部環(huán)境做準(zhǔn)備。我們通常在生產(chǎn)中生根培養(yǎng)基用糖少于增殖階段的原因即在此。
事實表明,若生根階段便進(jìn)入自然光條件下,植株可能表現(xiàn)出生長延緩和輕微失綠,但是,與低光照下濃綠的苗相比,移栽成活率會更高。
結(jié)合本人試驗過的幾個品種,下面討論植株生根的難易問題。眾所周知,在大田的扦插繁殖中就存在植株之間的生根難易不同的現(xiàn)象,相對應(yīng),在瓶苗生根階段,也存在差異。對于容易生根的品種(比如非洲菊的多數(shù)品種、蝴蝶蘭實生苗等),我們可用少量生長素或直接瓶外生根即可。
對于難生根的品種,我們可以通過減少增殖階段激素濃度、轉(zhuǎn)移兩次生根培養(yǎng)基等來實現(xiàn)生根率的提高。
對于紅掌來說,小苗在愈傷組織上未切分之時,也可有根長出,但是,我們最好再經(jīng)過一次生根培養(yǎng)基,因為可以看到這些根以須根為主,顏色淺黃、獨根,且往往是在莖的中部長出,在栽盆時容易造成麻煩,同時試驗證明此類根成活率低。
當(dāng)然,對一些品種來說,從嫩莖上切取插條,用生根粉采取泡或沾的方式進(jìn)行試管外生根也是一種節(jié)省成本的方法,但所用濃度及成活率必須提前進(jìn)行試驗。
第五階段:試管苗出瓶馴化及苗期管理試管苗在培養(yǎng)室的優(yōu)良環(huán)境下,基本以培養(yǎng)基中的糖為原料進(jìn)行異養(yǎng)生長,而出瓶之后,迫切需要使其利用太陽光進(jìn)行光合作用而自養(yǎng)生長,因此,這個轉(zhuǎn)化階段非常重要,直接影響著將來的瓶苗成活率。我們一般形象地把這一階段稱作種苗的“馴化”過程。
總的來說,在馴化過程中,要在初期保持較高的空氣濕度,減少葉面蒸騰;選擇疏松透氣的種植基質(zhì),并伴以殺菌、殺蟲劑;初期以漫射光為主,光照應(yīng)逐漸增強;視植物類型調(diào)節(jié)環(huán)境溫度,要求基質(zhì)溫度略高于空氣溫度2℃至3℃。
當(dāng)然,在設(shè)備、設(shè)施達(dá)到要求的前提下,最重要的應(yīng)是管理人員的責(zé)任心與積極的工作態(tài)度。種苗最終的出售規(guī)格,種苗生產(chǎn)公司自身應(yīng)制定一個最低標(biāo)準(zhǔn),兼顧客戶要求,在條件允許的情況下,應(yīng)堅持種苗預(yù)訂制度。
以上是花卉快繁生產(chǎn)的基本流程,在認(rèn)識到其對種苗生產(chǎn)的巨大推動作用的同時,我們還要看到組培快繁的局限性:市場需求是影響快繁的第一大因素。在有市場需求的前提下,我們就要結(jié)合生產(chǎn)量仔細(xì)周密估算成本,適當(dāng)?shù)膮⒄,可行的成活率?yīng)是成本核算準(zhǔn)確的關(guān)鍵。另外,如一些植物在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的變異,培養(yǎng)技術(shù)的不成熟,諸如褐化、玻璃化等問題,都需要我們在實踐中進(jìn)一步研究和解決。
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