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玫瑰愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)
愈傷組織的誘導(dǎo)Hill(1967)最早報道從雜交茶香月季（hybridtearose）的莖上誘導(dǎo)了愈傷組織，該實驗證明在培養(yǎng)基中添加2，4-D或添加NAA和激動素KT均能很快誘導(dǎo)出愈傷組織。隨后不同實驗以不同品種為試驗材料，從葉、葉柄、根、莖、原生質(zhì)體、合子胚、花藥、子房、花瓣、花萼、和花托成功地誘導(dǎo)了愈傷組織。
愈傷組織的成功誘導(dǎo)與品種的基因型有關(guān)?搖Lloyd等（1988）曾研究Roseprsica與xanthina，hybrida，Clarissa，Rcabrosa的愈傷發(fā)生能力，發(fā)現(xiàn)只有Rosepersica與xanthina在MS基本培養(yǎng)基上，添加低濃度的BAP和NAA時，節(jié)間能產(chǎn)生愈傷，愈傷組織脆弱，呈淡黃綠色。Kunitake等(1993)研究了RoserugosaThunb，Rosemultiflora，Roseallbacv，SemiplenaRosehybridacv，DuplesRoseharisonii，Rosespinosissi的未成熟種子的愈傷發(fā)生能力，發(fā)現(xiàn)只有RoserugosaThurb能產(chǎn)生愈傷組織，品種Rontl和Soraya比品種Baccara和Mercedes更易產(chǎn)生愈傷(Kintzios等，1999)。
外植體類型?搖Aren等（1993）詳細地調(diào)查了RosehybridacvMeirutral不同外植體的愈傷誘導(dǎo)率，發(fā)現(xiàn)不同外植體愈傷產(chǎn)生的能力不同，葉為90%，根為70%，節(jié)間為55%，花藥為19%。
激素激素也是影響愈傷生成的重要因素，Rout等（1991）以Landora為材料，在添加BA和NAA，2，4-D的MS的培養(yǎng)基上，外植體在接種的7～12d后，在近軸面的葉柄和中脈處產(chǎn)生愈傷，愈傷組織誘導(dǎo)頻率高達92%。在接種后15～20d，外植體莖切端處產(chǎn)生愈傷，誘導(dǎo)率為76%。生長素種類和濃度對愈傷產(chǎn)生能力的影響同樣很大。早期實驗多采用NAA結(jié)合BAP或BA等，近年來多采用2，4—D，并證明2，4—D是誘導(dǎo)愈傷的必要因素（Kintzios等，1999；Rout等，1996；vanderSalm等，1996；Vises—suwan等，1997）。進一步研究發(fā)現(xiàn)2，4-D對愈傷的誘導(dǎo)效果依賴于月季的基因型，如2，4—D濃度從113umol/L增加到181umol/L降低了Rosehybrida栽培種“Care-freeBeauty”的愈傷誘導(dǎo)頻率，但該濃度則對另一個品種“GrandGala”無影響。對于“RedSunblaze”而言，當濃度從113umol/L增加到452umol/L，則表現(xiàn)出愈傷的誘導(dǎo)率提高了，隨后當2，4—D再增加，則顯著地降低愈傷的誘導(dǎo)頻率。愈傷組織在誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基上能得到很好繼代培養(yǎng)（subculture、Li等，2002）。VanderSalm等（1996）證明2，4—D對誘導(dǎo)Rosepersica與xanthina和Moneyway產(chǎn)生愈傷是非常必要的，進一步添加低濃度的BA有正效應(yīng)，但如BA濃度過高，則產(chǎn)生抑制作用。與以上實驗結(jié)果不同，Kintzios等（1999）則發(fā)現(xiàn)2，4—D對愈傷誘導(dǎo)有負影響作用，可能因為采用的外植體是成熟的葉片。
合子胚的發(fā)育時期對愈傷的形成能力也有影響?搖如處于心形胚的合子胚，其愈傷誘導(dǎo)率只有2%，子葉胚時的合子胚愈傷誘導(dǎo)率達到85%。
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