秋海棠組培快繁

2017/8/30 10:28:04

（一）無菌材料獲得 將竹節(jié)秋海棠已平展之幼嫩葉片、葉柄、莖段先用適量洗衣粉對(duì)水洗滌，然后用自來水反復(fù)沖洗，于無菌條件下用75％酒精藥棉擦拭干凈，放于飽和漂白粉溶液10分鐘，后置于0．1%升汞溶液中消毒2分鐘，用無菌水沖洗5——6次，消毒濾紙吸收干表面水分，葉片切成0．5cm見方小塊，葉柄、莖段則切成約長(zhǎng)1cm左右長(zhǎng)條，均接種于培養(yǎng)基（1）上。

（二）叢芽的誘導(dǎo)與增殖 接種、培養(yǎng)1周后，葉、葉柄、莖段周圍開始膨大、增厚，質(zhì)地變硬，逐漸形式黃綠色愈傷組織，3周后漸漸分化出小芽點(diǎn)，芽點(diǎn)繼續(xù)生長(zhǎng)，約5周左右形成明顯的叢生芽。將叢生芽切成小塊，接種于（2）和（3）培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖，小芽叢上不斷分化出很多幼芽。葉、葉柄、莖段在兩個(gè)培養(yǎng)基上增殖速率基本相同，約4周左右繼代1次，增殖系數(shù)可達(dá)6——9。

（三）壯苗 在進(jìn)行大量增殖階段后，我們停止固體培養(yǎng)而改為液培，將分化芽轉(zhuǎn)接到1／2MS，3周后，可發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)健壯、個(gè)體粗壯的無根苗。這為以后生根、移苗出瓶，提高適應(yīng)外界環(huán)境，增強(qiáng)抗病能力，提供了良好條件，移栽更易成活。

（四）根的誘導(dǎo) 將高約3cm、生長(zhǎng)健碩的無根壯苗，接種到培養(yǎng)基（5）上。2周后，苗基部長(zhǎng)出輻射狀白色小根，每株生根5—7條，3周后，根伸長(zhǎng)至1．0—1．5cm，生根率達(dá)100％。

（五）試管苗的移栽 將培養(yǎng)有試管苗的三角瓶蓋打開，在實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)處煉苗3d，取出小苗，洗去根部殘留培養(yǎng)基，種植前根部在0．2%Na2SO4溶液中滯留片刻。移栽到用高壓滅菌消毒過的蛭石＋細(xì)沙＋園土（1：1：1）的混合基質(zhì)中，地上部噴施0．1％多菌靈溶液，用薄膜覆蓋，每天噴水2次，1周后揭膜，成活率在95％以上。

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