鐵皮石斛的莖段快繁

2017/7/23 10:42:19

鐵皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo是蘭科石斛屬多年生附生草本植物，因其莖節(jié)處呈黑褐色，又名黑節(jié)草，具有益胃生津、滋陰清熱、清咽利嗓，提高人體免疫能力、抗腫瘤、抗衰老等功效，主要分布于云南廣南、邱北、馬關(guān)、文山及怒江與恩梅開江的分水嶺一帶，海拔1600米以下，以及江南各省。多附生在亞熱帶人跡罕至的深山密林陰濕懸崖峭壁處、樹上或長青苔的巖石上。
鐵皮石斛的種子極小、無胚乳，自然條件下需與某些真菌共生才能萌發(fā)，很難用實(shí)生苗栽培；而傳統(tǒng)的分株、扦插等方式的繁殖率極低，加上人為的過度采挖和破壞生態(tài)環(huán)境，其資源已瀕臨滅絕，因而被國家列為重點(diǎn)保護(hù)的藥用植物之一，鐵皮石斛組織培養(yǎng)快速繁殖被國內(nèi)外學(xué)者廣泛關(guān)注。鐵皮石斛的莖段快繁直接取材于幼嫩莖段，具有取材易、速度快、污染率低、繁殖系數(shù)高等優(yōu)點(diǎn)，可在短期內(nèi)為生產(chǎn)提供大量栽培用苗，因而能有效保護(hù)這一寶貴資源。
1．外植體的消毒
石斛莖段在無菌操作臺(tái)上用75％的酒精進(jìn)行表面消毒，去掉灰塵，再用0.1％的升汞滅菌5～8分鐘，用無菌水沖洗3次，在此過程中應(yīng)不斷搖晃燒杯，使其充分滅菌。
2．試驗(yàn)過程
將已經(jīng)滅菌的石斛莖段，在無菌條件下切成至少帶有一個(gè)莖節(jié)的莖段，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)出芽，將芽再誘導(dǎo)出原球莖，原球莖再分化，再壯苗，便可將生長健壯的植株移栽。
3．培養(yǎng)基
基本培養(yǎng)基為N6，附加0.75％瓊脂，3％白糖，PH值為5.8，培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)高溫高壓滅菌，溫度為121℃，1.1Mpa，15分鐘即可。激素添加如下①誘導(dǎo)莖節(jié)發(fā)芽：N6＋BA2.5毫克／升；②誘導(dǎo)芽形成原球莖：N6＋BA2.5毫克／升＋I(xiàn)－BA 0.5毫克／升；③誘導(dǎo)原球莖分化為植株：N6+BA 1.5毫克／升+NAA 1.2毫克／升＋香蕉汁5％；④生根壯苗培養(yǎng)：N6+NAA 2.5毫克／升+土豆汁10％。
或基本培養(yǎng)基為MS，附加0.75％瓊脂，3％白糖，pH5.8。（1）芽增殖培養(yǎng)基：MS＋NAA 0.1～0.5毫克／升＋BA0.5～2.0毫克／升；（2）壯苗培養(yǎng)基：MS無激素培養(yǎng)基；（3）生根培養(yǎng)基：1/2MS+IBA0.1毫克／升。
4．培養(yǎng)條件：
溫度控制在25±1℃，日光燈照射，每天12小時(shí)。
5．移栽
移栽時(shí)先將已經(jīng)長大的石斛種苗取出，用清水洗去根部的培養(yǎng)基，洗凈為止，動(dòng)作要輕，避免損傷其根和葉。然后栽種在以礦質(zhì)巖：泥炭土為1∶1的基質(zhì)中。放在遮蔭棚里練苗一周，便可正常管理，保持濕度80％，溫度不可超過35℃，不接受長時(shí)間的陽光直射。

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