紅葉石楠組培技術(shù)

2017/7/22 11:34:00

組織培養(yǎng)已成為當(dāng)前農(nóng)林種苗生產(chǎn)中的一種重要的繁殖手段，與常規(guī)的無(wú)性繁殖方法相比，它具有繁殖速度快、周年生產(chǎn)、產(chǎn)品一致性好等優(yōu)點(diǎn)，尤其在繁殖一些種源稀缺的品種時(shí)，更能體現(xiàn)它的優(yōu)勢(shì)。紅葉石楠是近年從國(guó)外引進(jìn)的一個(gè)國(guó)際新品種，組織培養(yǎng)可以分以下幾個(gè)步驟進(jìn)行：外植體的取得→初代培養(yǎng)（無(wú)菌系的建立）→繼代培養(yǎng)（增殖培養(yǎng)）→生根培養(yǎng)→煉苗及過(guò)渡移栽→移植到大田。

外植體的取得

選擇紅葉石楠的莖尖和莖段作為組培用的外植體。在取得紅葉石楠母株后，先置于溫室內(nèi)培養(yǎng)2周左右，期間注意不灑葉面水，每隔3－5天噴施一次殺菌劑，可有效降低初代培養(yǎng)時(shí)的污染率。在實(shí)際操作中，選取嫩枝先端未木質(zhì)化和半木質(zhì)化部分，剪成長(zhǎng)10cm左右的單芽，莖段部分去葉留2mm左右葉柄，莖尖部分可保留半張小葉，以飽和洗衣粉溶液浸泡3分鐘，用清水沖洗后備用。

初代培養(yǎng)

清洗后的外植體在接種前需進(jìn)行消毒處理，在超凈工作臺(tái)上用75％酒精浸泡10秒鐘，再轉(zhuǎn)入0.15％升汞溶液中滅菌8分鐘，倒去滅菌液，用事先準(zhǔn)備好的無(wú)菌水沖洗4－5次，瀝干水后，即可將帶腋芽的莖段或莖尖以生態(tài)學(xué)下端朝下，垂直接種到初代培養(yǎng)基上，以每瓶培養(yǎng)基接種一個(gè)外植體為宜。經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，初代培養(yǎng)基以1/2MS+蔗糖30g＋瓊脂7g＋2.0BA+0.2IBA為最佳，pH值5.5－5.8，培養(yǎng)室溫度控制在25℃－30℃之間，光照12小時(shí)。接種后一周左右腋芽開(kāi)始萌動(dòng)，30－40天可伸長(zhǎng)到2cm左右，即可切下進(jìn)入下一階段的繼代（增殖）培養(yǎng)。

繼代培養(yǎng)（增殖培養(yǎng)）

一般第一次繼代時(shí)增殖率較低，經(jīng)2－3次繼代后增殖數(shù)可達(dá)5倍左右。繼代培養(yǎng)基可用MS+1.0BA+0.1IBA，pH值5.5－5.8之間，每日光照12小時(shí)。無(wú)根的試管苗經(jīng)30－40天培養(yǎng)達(dá)到3cm左右時(shí)，即可切割以擴(kuò)大繁殖。當(dāng)繼代苗達(dá)到一定數(shù)量后，可以進(jìn)行生根培養(yǎng)。

生根培養(yǎng)

當(dāng)紅葉石楠無(wú)根苗長(zhǎng)到高2cm左右時(shí)，可轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基可用1/2MS+0.2-0.3NAA，一般經(jīng)一周左右可見(jiàn)紅色根生成，30－40天后根長(zhǎng)1－3cm，即可進(jìn)行煉苗反馴化，準(zhǔn)備移栽。

煉苗及過(guò)渡移栽

紅葉石楠組培苗移栽可省略瓶?jī)?nèi)煉苗過(guò)程，如能在溫室中擰松瓶蓋放置3－5天煉苗則更好，但要注意溫度應(yīng)控制在20℃－30℃之間。過(guò)渡移栽是整個(gè)組培過(guò)程中最為關(guān)鍵的一步，如失敗，則前功盡棄。因此移栽前要準(zhǔn)備充分，如能在早春和秋冬季移栽在溫床上效果最佳。在實(shí)際操作中，應(yīng)根據(jù)不同地區(qū)的氣候特點(diǎn)而有所區(qū)別。在江浙一帶，過(guò)渡苗床可建在普通單體塑料大棚內(nèi)，床寬1.2m左右，床四周用磚砌高30cm，床底整平，有條件的可加鋪地?zé)峒訙鼐�，上鋪15－25cm的移栽基質(zhì)，基質(zhì)以蛭石∶珍珠巖∶泥炭＝1∶1∶1為好。

組培苗是在無(wú)菌條件下繁育的，在移栽過(guò)程中對(duì)外界環(huán)境需要一個(gè)漸進(jìn)的適應(yīng)過(guò)程，因此需要對(duì)過(guò)渡苗床進(jìn)行較為嚴(yán)格的消毒處理。實(shí)踐中我們使用1000倍敵克松溶液澆透整個(gè)苗床基質(zhì)，再用0.15％高錳酸鉀溶液噴灑苗床表面及四周，24小時(shí)后即可移栽小苗。也可用800倍福爾馬林噴灑苗床表面，用塑料薄膜密封24小時(shí)以上，再通風(fēng)12小時(shí)，即可使用。

幼苗從瓶?jī)?nèi)取出后，用清水將根部的瓊脂等洗凈，同時(shí)應(yīng)注意盡量減少根部損傷。種入苗床后，澆灌時(shí)盡可能選擇清潔的水源，移栽當(dāng)天噴施1/4－1/2MS營(yíng)養(yǎng)液，并噴施800－1000倍甲基托布津或1000倍多菌靈藥液，以后每隔一周?chē)娛┮淮�，需連續(xù)噴施3－4次，移栽初期需特別注意保持苗床和空氣濕度，一般需全封閉管理一周左右，再半封閉一周左右，根據(jù)天氣情況在25天左右可逐步通風(fēng)，除去覆蓋物。在春秋季節(jié)移栽時(shí)，需遮蔭三周左右，冬季遮蔭二周左右即可。同時(shí)應(yīng)注意控制苗床溫度在15℃－30℃之間才利于成活，如環(huán)境溫度超過(guò)35℃，則不宜移栽。一般過(guò)渡移栽50天后，小苗就可上盆移栽，春季就可移入大田。

大田移栽

大田移栽的時(shí)機(jī)應(yīng)根據(jù)小苗生長(zhǎng)情況和天氣情況確定。一般小苗長(zhǎng)至5cm以上移栽就可以保證95％以上成活率，如在10cm以上移栽則效果更好。大田移栽后期管理與其他方法繁殖的小苗一樣操作即可。

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