夏季降低組培苗污染的五項(xiàng)措施

在植物組織培養(yǎng)過程中，污染是不可避免的，但可以把污染控制在最低限度內(nèi)。污染通常是由于環(huán)境不潔、培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料消毒不徹底、操作過程不慎、操作人員或工具帶菌而引起。組培污染既影響了繁殖速度，又增加了生產(chǎn)成本，嚴(yán)重時(shí)可造成培養(yǎng)材料的丟失，給組培繁殖帶來較大的損失。

污染的病原有細(xì)菌和真菌兩大類。夏季溫度高、濕度大，各種病原菌繁殖速度快，是組培污染的高發(fā)期，如果控制不好，導(dǎo)致污染嚴(yán)重，會(huì)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，甚至?xí)肮ΡM棄。因此，在夏季防止和降低污染是組培工作者的重要工作之一，應(yīng)予以足夠重視。根據(jù)多年實(shí)踐工作的積累，下面討論降低污染的五項(xiàng)有效措施。

1. 保持干凈整潔的環(huán)境是減少污染的基本要求.

組培室是一個(gè)微環(huán)境，保持這個(gè)微環(huán)境的干凈、整潔，能有效的防止污染。具體要做到：每周對(duì)整個(gè)組培室進(jìn)行一次徹底的大掃除；接種室和培養(yǎng)室要求密閉、干燥，保持與外界環(huán)境相對(duì)隔絕的狀態(tài)，盡量減少與外界的空氣對(duì)流及微生物與塵埃的侵入�？刂坪霉�、溫、濕、氣等各種生態(tài)因子，夏季高溫、高濕時(shí)，要即時(shí)降溫和排濕；定期用消毒液對(duì)接種室和培養(yǎng)室內(nèi)的設(shè)備、墻壁及地面進(jìn)行擦洗；經(jīng)常用 70%的酒精對(duì)接種室和培養(yǎng)室進(jìn)行噴霧降塵；定期用紫外燈對(duì)接種室和培養(yǎng)室進(jìn)行空氣消毒，每次開啟 30-50 分鐘；定期檢查超凈工作臺(tái)上的風(fēng)速和清洗過濾器。

2. 潔凈的培養(yǎng)容器和培養(yǎng)基的徹底滅菌是減少污染的必然要求.

培養(yǎng)瓶、試管等容器和封口用的蓋子、耐高溫的塑料膜等物品在用前要經(jīng)過徹底清洗、晾干。配制好的培養(yǎng)基分裝后應(yīng)立即高壓蒸汽滅菌，即在1.1kg/cm2 的壓力，鍋內(nèi)溫度達(dá)到 121℃，持續(xù)保持 20-30 分鐘。經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基，放置 2-3 天，若培養(yǎng)基表面和內(nèi)部無任何細(xì)菌痕跡，確實(shí)證明已徹底滅菌，方可使用。

3. 嚴(yán)格規(guī)范且熟練的無菌操作過程是減少污染的關(guān)鍵.

在無菌操作過程中，工作人員嚴(yán)格按照無菌操作的要求，規(guī)范熟練地完成好每一個(gè)步驟，能有效地減少由操作引起的污染。具體要做到：

（1）接種前，工作人員的雙手必須用肥皂水洗凈，進(jìn)入接種室后換上工作服、戴上口罩，用 70%的酒精擦拭消毒雙手；

（2）用 70%的酒精擦拭超凈工作臺(tái)，接種工具（如剪刀、手術(shù)刀、鑷子等）使用前要在 70%酒精中浸泡，再在火焰上灼燒，冷卻后使用；

（3）在超凈工作臺(tái)上正確擺放接種用具、培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基，臺(tái)面上的東西不能堆放太多，以免影響氣流；

（4）接種過程中應(yīng)避免他人來回走動(dòng)，操作人員禁止談話，并盡量避免操作人員頭部伸入超凈工作臺(tái)的工作區(qū)內(nèi)；

（5）培養(yǎng)瓶的開啟、接種材料的切割、分裝、封口等步驟要規(guī)范熟練，避免交叉污染；

（6）每切割、轉(zhuǎn)接完一瓶母種材料后，要及時(shí)更換無菌紙，重新更換所用的接種工具，最好備兩套交替使用。

4. 培養(yǎng)材料（外植體和基礎(chǔ)母瓶）的嚴(yán)格篩選和徹底的表面消毒是減少污染的基礎(chǔ)工作.

選擇適宜的外植體材料常常是組培工作成敗的關(guān)鍵，通常選取生長(zhǎng)健壯、無病斑的植株上的處于生長(zhǎng)活躍狀態(tài)的幼嫩莖尖，尤以剛剛萌發(fā)的幼芽比較理想，可以大大減少材料的污染。夏季避免陰雨天在戶外采取外植體，因?yàn)殛幱晏鞄Ь^多，在晴天采材料時(shí)，下午采取的外植體要比早晨采的污染少，因?yàn)椴牧辖?jīng)過日曬后可殺死部分細(xì)菌或真菌。采集回來的外植體經(jīng)自來水清洗后，在超凈工作臺(tái)上對(duì)其進(jìn)行徹底的表面消毒，在消毒過程中應(yīng)當(dāng)正確選擇消毒劑的濃度和處理時(shí)間，做到既消毒徹底，又盡量減少由消毒劑引起的組織的死亡�；A(chǔ)母瓶擴(kuò)繁過程中，母瓶的選擇也至關(guān)重要，帶菌的母瓶不能再用作母種，避免污染的擴(kuò)大，接種前，還應(yīng)用 70%酒精擦拭母瓶表面，以免開啟母瓶時(shí)，灰塵落入瓶中造成污染。

5. 污染物的正確處理是防止污染傳播蔓延的有效途徑.

組織培養(yǎng)中污染是經(jīng)常發(fā)生的，一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物污染，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行及時(shí)處理，否則會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)室環(huán)境污染，造成污染的蔓延和相互傳染。首先立即把污染物從培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移出去，然后對(duì)其進(jìn)行高壓消毒滅菌，再在離組培室較遠(yuǎn)的地方清除滅過菌的污染的培養(yǎng)物，最后徹底清洗培養(yǎng)瓶，晾干后待用。

相關(guān)信息

①本站信息來源于網(wǎng)絡(luò)與會(huì)員發(fā)布,僅供瀏覽參考，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性,請(qǐng)謹(jǐn)慎采納.本站不做任何擔(dān)保.

②本站未注明稿件來源的稿件均為轉(zhuǎn)載,出于傳遞更多信息的意義，并不意味著贊同其觀點(diǎn),轉(zhuǎn)載言論不代表本站觀點(diǎn).

③如轉(zhuǎn)載文章信息侵犯了您的版權(quán)，請(qǐng)及時(shí)與本站取得聯(lián)系.