1引言
郁李(Prunus japonica Thunb)屬薔薇科、櫻屬。落葉灌木,高約1.5m,小枝纖細(xì),葉卵圓形,長3~7cm,寬1.5~2.5cm,先端漸尖,基部圓形,邊緣有淺重鋸齒,花先于葉或與葉同時(shí)開放,花梗長5~10mm,花直徑約2cm,倒卵形,花瓣粉紅色或近白色,核果近球形,直徑約1cm,暗紅色,光滑而有光澤,花期 3~5月,是園林中重要的觀花、觀果樹種,常與棣棠、迎春等其他花木配植,也可作花籬栽植。郁李常規(guī)用種子繁殖,花色變化大,花色的不確定性加大了植物配置難度,限制了郁李的使用,而微型繁殖技術(shù)不但可以快速繁殖,同時(shí)使花色穩(wěn)定,利于園林利用。
2材料與方法
2.1材料
選取健壯的枝條,用飽滿而未萌發(fā)的側(cè)芽作為外植體,切成小段,每段長2~3cm。每段帶有1個(gè)側(cè)芽,用自來水沖洗15min,在無菌條件下用 75%的酒精消毒30s,再用0.1%升的汞消毒7~8min,最后用無菌水沖洗6~8遍,在超凈工作臺(tái)上把它們接種于不同的培養(yǎng)基上。
2.2方法
2.2.1側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)
以MS為基本培養(yǎng)基,不同種類、濃度的生長調(diào)節(jié)劑組合形成1~48號(hào)側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基(表1),將外植體接種于不同的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)2周后,觀測生長情況。
根據(jù)2.2.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果,將誘導(dǎo)培養(yǎng)中高達(dá)到1cm的側(cè)芽,接種于以MS為基本培養(yǎng)基,KT濃度分別為2.0 mg/L、2.5 mg/L、3.0 mg/L、3.5 mg/L、4.0mg/L,IBA濃度分別為0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,培養(yǎng)2周后,觀測生長情況。
2.2.3生根培養(yǎng)
將誘導(dǎo)培養(yǎng)中高達(dá)到1cm的側(cè)芽,接種于以1/2MS為基本培養(yǎng)基,KT濃度分別為0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L,IBA濃度分別為0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L的生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)2周后,觀測生長情況。
3結(jié)果與分析
3.1側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)
外植體在不同的側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基生長15d,每種培養(yǎng)基隨機(jī)抽取10個(gè)樣本,統(tǒng)計(jì)分析誘導(dǎo)率結(jié)果,從表2可以看出NAA對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有一定影響,但差異不顯著;IBA對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有顯著影響,以0.1 mg/L最好,0.5mg/L次之,1.0mg/L最差;BA對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有顯著影響;KT對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)結(jié)果有極顯著影響;NAA×BA的交互作用對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)不顯著;NAA×KT和IBA×BA的交換作用對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)均顯著;IBA×KT交換作用對(duì)側(cè)芽誘導(dǎo)極顯著。IBA與KT組合好于其他組合,從圖1可以看出IBA與KT組合的28號(hào)培養(yǎng)基側(cè)芽誘導(dǎo)率最高,達(dá)到87.9%,即MS+KT1.5+IBA0.1側(cè)芽誘導(dǎo)效果最好。
3.3生根培養(yǎng)
隨機(jī)抽取不同培養(yǎng)基各40個(gè)樣品,統(tǒng)計(jì)有效根發(fā)生率(表4),IBA促進(jìn)生根效果顯著(P<0.05),濃度低于1.0 mg/L時(shí)隨著濃度增加促進(jìn)生根效果明顯,濃度大于1.0 mg/L時(shí),形成愈傷組織、出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象增加,因而隨著濃度增加有效根數(shù)量減少;KT抑制根的發(fā)生,隨著濃度的增加有效生根率較低。最佳根誘導(dǎo)培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA0.5,生根率達(dá)85%。
郁李微型繁殖誘導(dǎo)側(cè)芽分化最佳培養(yǎng)基:MS+KT1.5+IBA0.1mg/L,誘導(dǎo)率達(dá)到87.9%;叢生芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基:MS+KT3.0mg/L+IBA0.1 mg/L,增值率為5.9;生根最佳培養(yǎng)基:1/2MS+IBA0.5 mg/L,生根率85%。