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蝴蝶蘭的組培技術(shù)

2013/9/26 9:32:12

蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)技術(shù)蝴蝶蘭為蘭科多年生附--生草本,又名蝶蘭,是蘭科植物中栽培最為廣泛的種類之一,主要分布在熱帶及亞熱帶地區(qū)。其花形奇特,色彩艷麗,花期持久,素有“蘭中皇后”的美譽(yù),具有極高的觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值,在國內(nèi)外花卉市場上極受歡迎。蝴蝶蘭是單莖氣生蘭,植株上極少發(fā)育側(cè)枝,比其他種類的蘭花更難于進(jìn)行常規(guī)無性養(yǎng)殖。組織培養(yǎng)是建立蝴蝶蘭快速養(yǎng)殖無性系的重要手段。

1外植體的選擇

蝴蝶蘭的莖尖、莖段、葉片、花梗側(cè)芽、花梗節(jié)間、根尖等部位都已有培養(yǎng)成功的報(bào)道,方法各異,難度各有高低。蝴蝶蘭不同外植體的成活率有差異,其中花梗側(cè)芽的成活率最高,達(dá)75%;其次為花梗,成活率為62.5%;葉片和根尖最差,分別為12.5%和7.5%。針對不同外植體,取材方法也不同,通常取花梗節(jié)之間1~2cm長的幼嫩部分,切取長2~3mm的切段作為外植體。

2基本培養(yǎng)基的選擇

蝴蝶蘭組織培養(yǎng)所采用的基本培養(yǎng)基包括MS、1/2MS、VW、B5、KC、花寶及其改良型等,其中1/2MS對蝴蝶蘭原球莖增殖效果最好。

3外源激素的選擇

目前常使用的外源激素主要是生長素類(如IAA、2,4-D和NAA)和細(xì)胞分裂素類(如BA、ZT、KT)。蝴蝶蘭組織培養(yǎng)中常用的細(xì)胞分裂素為6-BA,較高濃度(1~8mg/L)的6-BA能促進(jìn)蝴蝶蘭原球莖增殖,較低濃度(0.1~0.5mg/L)的6-BA則能促進(jìn)原球莖分化。適宜濃度的6-BA配合較低濃度的NAA,更有利于原球莖的增殖,2.0mg/L6-BA和0.3mg/LNAA配合使用是蝴蝶蘭原球莖增殖的最佳組合。

4培養(yǎng)基添加物對蝴蝶蘭增殖和分化的影響

蝴蝶蘭組織培養(yǎng)中常加入一些天然物質(zhì)如椰乳、香蕉泥、番茄汁、蘋果汁等,這些物質(zhì)能提供一些必要的微量營養(yǎng)成分、生理活性物質(zhì)和生長激素等,如加入100~200mg/L香蕉泥,具有較大的pH緩沖作用,有利于蘭科植物的壯苗和生根。許多資料也表明,添加適量的香蕉泥、椰乳或含膠質(zhì)的果菜汁等均對原球莖增殖有明顯促進(jìn)效果。

適量的添加物對蝴蝶蘭叢生芽的誘導(dǎo)和生根也有一定的促進(jìn)作用。培養(yǎng)基中添加活性炭,低濃度(0.5~1.0g/L)時(shí)對原球莖增殖影響不明顯,但可促進(jìn)蝴蝶蘭生根;高濃度(2.0~3.0g/L)時(shí)對原球莖增殖有促進(jìn)作用,但原球莖有黃化現(xiàn)象。

蔗糖作為培養(yǎng)基的能源物質(zhì)和滲透調(diào)節(jié)劑,對原球莖的增殖生長影響較大。蔗糖含量為2%時(shí),原球莖分化速度最快;蔗糖含量為2%~3%時(shí),促進(jìn)芽的形成;蔗糖含量為5%時(shí),有利于根的分化和生長。蔗糖含量為3%~5%時(shí),抑制原球莖的分化和生長,分化質(zhì)量和分化速度都顯著下降。

5原球莖繼代中褐化的防治

蝴蝶蘭和其它蘭科植物一樣,原球莖狀體在繼代培養(yǎng)過程中易褐變死亡,不易增殖。在培養(yǎng)基中添加1~2g/L活性炭,適時(shí)切除培養(yǎng)物的褐化部分并及時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基,能有效抑制外植體褐變死亡;培養(yǎng)基中加入10%椰子水,也能促進(jìn)原球莖的生長,減少原球莖增殖過程中的褐變。蝴蝶蘭的群體效應(yīng)很明顯,單芽容易褐化死亡,且增殖較慢,因此,剛誘導(dǎo)出的原球莖狀體不能過早切割轉(zhuǎn)移,在繼代階段接種時(shí),應(yīng)盡量避免切成單芽,增殖時(shí)切塊也不宜過小,否則容易褐化死亡。6~8月份高溫季節(jié)采芽排出的褐變物質(zhì)多,成活率也最低,所以要避免在夏季采芽。

6外界條件對蝴蝶蘭的影響

培養(yǎng)基的pH值直接影響到培養(yǎng)物對離子的吸收,過酸或過堿都對植物材料生長有很大影響,此外,瓊脂培養(yǎng)基的pH還影響到凝固情況。原球莖在pH值5.0~5.4的環(huán)境中生長最好,叢生芽的誘導(dǎo)與增殖在pH值5.6~5.8的環(huán)境中較好。

蝴蝶蘭在組織培養(yǎng)中,通常都以日光燈為光源,因此,可以人為地進(jìn)行控制其光照強(qiáng)弱。光照強(qiáng)度對試管苗發(fā)根和生長勢均有明顯的影響。光照為3000lx對蝴蝶蘭根誘導(dǎo)和植株生長有利。

在誘導(dǎo)蝴蝶蘭叢生芽過程中,由于所取的花梗芽為花芽,在培養(yǎng)過程中,較低的溫度影響(15~22℃)會使大部分花梗芽發(fā)育成花芽;在較高溫度(23~26℃)下培養(yǎng),花;ㄑ哭D(zhuǎn)化為營養(yǎng)芽,所以在進(jìn)行蝴蝶蘭叢生芽誘導(dǎo)時(shí)的適宜溫度條件為(25±2)℃。

7生根壯苗及移栽

生根壯苗階段關(guān)鍵在于嚴(yán)格篩選激素的種類和濃度,一般需降低培養(yǎng)基的激素含量,以便形成健壯苗。常用的生長素有IBA(0.3~1.5mg/L)、NAA(0.1~0.8mg/L)。添加GA30.1mg/L+NAA0.1mg/L的組合能明顯提高生根率,且植株健壯,長勢好。

蝴蝶蘭屬熱帶氣生蘭,具氣生根,栽培上要求根部通氣良好,F(xiàn)在蝴蝶蘭移栽常用基質(zhì)有水苔、椰糠、蛇木、樹皮等,以水苔效果較好。

綜上所述,用組培方法快繁蝴蝶蘭較傳統(tǒng)養(yǎng)殖方法有3個(gè)明顯的優(yōu)點(diǎn):①節(jié)省育苗用地;②節(jié)省養(yǎng)殖材料,提高養(yǎng)殖系數(shù);③利用莖尖脫毒培養(yǎng),挽救因受病毒侵染而退化的優(yōu)良品種,提高質(zhì)量和欣賞價(jià)值。總之,組培快繁技術(shù)可大大提高生產(chǎn)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

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