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萬(wàn)壽菊葉斑病的癥狀描述
2013/7/3 8:28:07
王龍1,張霄凌2,何冬云1,楊義榮2,王生榮1※,王致和2,陳乓1
(1甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院,蘭州730070;2甘肅省農(nóng)墾農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,蘭州733006)
摘要:2006年對(duì)萬(wàn)壽菊
葉斑病
在甘肅主要栽培區(qū)的武威黃羊鎮(zhèn)、古浪、景泰等地發(fā)生情況的調(diào)查結(jié)果表明,發(fā)病率在33% - 85%,病情指數(shù)在5.7 - 48.0。通過(guò)室內(nèi)分離鑒定,確定引起當(dāng)?shù)厝f(wàn)壽菊葉斑病的病原為真菌類的鏈格孢Alternaria sp.。
關(guān)鍵詞:萬(wàn)壽菊;葉斑。徊『φ{(diào)查;病原鑒定;鏈格孢
萬(wàn)壽菊(Tagetes erectaL)作為觀賞植物和藥用植物在世界上有廣泛分布,是園林中常見(jiàn)的草本
花卉
。作為藥用植物,其花和根可入藥,有清熱解毒、化痰止咳、解毒消腫之功能L1.21。近年來(lái),其鮮花又成為提取天然食用色素的一種工業(yè)原料,市場(chǎng)應(yīng)用前景廣闊,國(guó)際需求量不斷增加。但是隨著種植面積的擴(kuò)大,病蟲害的嚴(yán)重發(fā)生成為其發(fā)展的一個(gè)限制因素,特別是萬(wàn)壽菊葉斑病的發(fā)生,可導(dǎo)致萬(wàn)壽菊
葉片
早枯,花蕾凋萎。其發(fā)病率一般在20% - 30%,嚴(yán)重時(shí)可達(dá)95%以L,尤其7月中旬以后顯著加重,而且蔓延迅速,短時(shí)間內(nèi)即可蔓延至全田,普遍發(fā)牛,造成嚴(yán)重?fù)p失。為了搞清引起葉斑病的病原,以期為生產(chǎn)上有效地控制該病提供依據(jù)。
l材料與方法
1.1萬(wàn)壽菊葉斑病田間調(diào)查
2005年9月至2006年9月,先后對(duì)甘肅省武威市黃羊鎮(zhèn)、古浪縣和白銀市景泰縣萬(wàn)壽菊栽培基地萬(wàn)壽菊葉斑病的發(fā)生情況(病害的發(fā)生、為害程度、產(chǎn)量損失估計(jì))進(jìn)行了專項(xiàng)調(diào)查。調(diào)查采用5點(diǎn)取樣法,每樣點(diǎn)取樣20株。對(duì)栽培區(qū)不同發(fā)病類型進(jìn)行調(diào)查、采樣,采集不同階段不同發(fā)病部位及不同癥狀表現(xiàn)的植株,將標(biāo)本用吸水紙壓干,填寫好標(biāo)本登記卡,以備室內(nèi)鑒定。
調(diào)查分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下:0級(jí)——植株無(wú)癥狀;1級(jí)一植株下部葉片有零星病斑,發(fā)病葉片少于1%;2級(jí)——植株中部、下部葉片發(fā)病,發(fā)病葉片在1% - 5%之間;3級(jí)一植株葉片發(fā)病在5% - 20%之間,病斑有愈合發(fā)生;4級(jí)——植株發(fā)病嚴(yán)重,葉片枯死,花及花萼受到侵染枯死變黑。
1.2萬(wàn)壽菊葉斑病的癥狀描述
在室內(nèi)首先對(duì)標(biāo)本進(jìn)行癥狀描述:病斑著生部位、形狀、顏色、大小及其它特征等。
1.3病原菌的分離與純化
在室內(nèi)對(duì)植株不同發(fā)病部位(葉、莖、花)進(jìn)行常規(guī)分離,即切取小塊病組織,用75%的酒精擦拭組織表面后用0.1%的升汞水溶液表面消毒1 min,然后用無(wú)菌水沖洗3次,將病組織移植于PDA平板培養(yǎng)基上,在25℃下培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌落后將分離物進(jìn)行編號(hào);利用2%瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋純化,將配好的孢子液滴移到瓊脂平板培養(yǎng)基,鏡檢只有單個(gè)孢子的部位,做好標(biāo)記再移植,從而得到純培養(yǎng)菌株。
1.4致病性測(cè)定
將獲得的各菌株用PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)于25℃溫箱中培養(yǎng)5-7天,配成濃度為105 - 106個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液,分別采用普通噴霧法、高壓噴霧法及摩擦接種法對(duì)健康萬(wàn)壽菊植株進(jìn)行接種[3-5]。接種后置于25℃
溫室
內(nèi),連續(xù)觀察并記錄發(fā)病情況、發(fā)病癥狀,之后再分離。
1.5病原菌形態(tài)特征
對(duì)有致病性的菌株,依據(jù)真菌學(xué)常規(guī)方法,在PCA平板培養(yǎng)基卜培養(yǎng)5-7天,觀察并記錄各菌株的菌落形狀、色澤;用顯微鏡鏡檢測(cè)定分牛孢子梗的大小、著生部位、形態(tài),記載分生孢子縱橫隔膜的數(shù)目、顏色,喙的有無(wú)、長(zhǎng)短及形態(tài)。按照分類系統(tǒng)確定病原菌的種類。對(duì)有些不產(chǎn)孢子的種類,采用不同的營(yíng)養(yǎng)要求和培養(yǎng)條件來(lái)誘發(fā)和刺激產(chǎn)孢,根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)鑒定病原種類。
2結(jié)果與分析
2.1田間調(diào)查結(jié)果
從調(diào)查結(jié)果(表1)可以看出,萬(wàn)壽菊葉斑病在甘肅省黃羊河農(nóng)場(chǎng)、古浪縣和景泰縣萬(wàn)壽菊栽培基地普遍發(fā)生,發(fā)病率—般在23% - 95%。但發(fā)病的嚴(yán)重程度各地差異較大,病情指數(shù)低的只有5.75,病情指數(shù)最高的地塊可達(dá)48.5;從各地的發(fā)病情況來(lái)看,白銀市景泰縣病害發(fā)生較為嚴(yán)重,武威市黃羊河農(nóng)場(chǎng)次之,古浪縣發(fā)病相對(duì)較輕;從不同前茬作物與發(fā)病的關(guān)系看,前茬為胡麻發(fā)病嚴(yán)重,荒地或貧瘠土地發(fā)病也較重,前茬種植大麥、小麥和玉米發(fā)病次之,前茬為百號(hào)(種藥用植物)發(fā)病較輕。
2.2萬(wàn)壽菊葉斑病的癥狀
萬(wàn)壽菊葉斑病在甘肅省萬(wàn)壽菊栽培區(qū)從幼苗期到成株期均可發(fā)牛,病菌主要為害葉、莖、花。
(1)苗期發(fā)病,葉片正面產(chǎn)生針尖大小褐色或紅褐色圓形、近圓形病斑,病斑中央灰白色或黃白色,邊緣黑褐色,葉片背面的病斑邊緣不規(guī)則。溫濕度適宜時(shí),病葉上密布褐色小點(diǎn),并可愈合成片,嚴(yán)重時(shí)造成葉片枯死,導(dǎo)致死茁。
(2)成株期葉片發(fā)病,自下部葉片逐漸向上部蔓延,從葉片緣處或從葉片巾部開始發(fā)生。初期病斑如針尖大小,褐色,圓形或橢圓形,少數(shù)不規(guī)則形,巾央灰白或黃白色,邊緣黑褐色壞死,葉背面的病斑呈黃褐色。病斑一般直徑大小為0.5 mm,最大直徑可達(dá)7.0 mm。以后病斑逐漸擴(kuò)大形成橢圓形或不規(guī)則形的紫褐色病斑。發(fā)病嚴(yán)重時(shí),病斑連片,造成葉片枯死。
(3)莖部染病,多從葉腋處先發(fā)生,并向新生枝及主莖擴(kuò)展,造成病部變褐變紫,病斑多為圓形或長(zhǎng)橢圓形。嚴(yán)重時(shí),病斑可以布滿莖表,使莖的表皮呈紫褐色,造成植株生長(zhǎng)衰弱。摘花后常從摘口處向下變黑干枯。
(4)花部受害,多從花萼開始,初為褐色小點(diǎn),中央灰白色,邊緣有紫褐色壞死線,以后逐漸擴(kuò)展,并引起花瓣染病,引起花瓣凋萎,嚴(yán)重時(shí)整朵花密布病斑,花瓣變褐枯死,苞片變黑,嚴(yán)重影響產(chǎn)量和品質(zhì)。
2.3病原菌分離
采用組織分離法,在PDA培養(yǎng)基上先后分離200個(gè)病塊組織,分離到160個(gè)菌落。根據(jù)菌落形態(tài)將其歸為3類,其中鏈格孢屬(Altemaria sp.)為149株,占74.5%,灰霉菌(Botrytis sp.)為4株,占2%,其他7株,占3.50/。
在鏈格孢中,根據(jù)菌落顏色分為H1和H2兩類。
2.4致病性測(cè)定
對(duì)鏈格孢的2種菌株采用摩擦和噴霧接種方法均可使植株發(fā)。ū2),發(fā)病癥狀與田間一致,從接種的健康萬(wàn)壽菊植株上均可熏新分離獲得同一病原菌,說(shuō)明病菌可以從傷U或自然孔口直接侵入,但有傷口比無(wú)傷口發(fā)病速度更快,且致病率高。
2_5病原菌的形態(tài)特征
對(duì)分離到的致病菌,在PDA和PCA平板培養(yǎng)基卜培養(yǎng),1周后的菌落形態(tài)是:菌落墨綠色或橄欖色,后期黑褐色,氣生菌絲豐富,棉絮狀,分生孢子梗單生或簇生,直或向一側(cè)彎曲,淺褐色,有分隔。分生孢子的大小為(18.3 - 25.4)×(8.8 -12.0)um,平均為21.6×10.6 um;倒棍棒形、長(zhǎng)卵圓形、梭形等;初色淺,后呈黃褐色、深褐色;有2~4個(gè)橫隔,0-3個(gè)縱隔,分隔處有縊縮;喙較短,柱狀,大小為(2.74 - 4.5)×(2.4 - 4.16)“m.無(wú)分隔。
分離到的2個(gè)菌株,盡管菌落顏色有一些差異,但在主要形態(tài)特征方面沒(méi)有顯著差異,認(rèn)為屬于同一種,確定為鏈格孢(Alternaria sp.)。
該菌與萬(wàn)壽菊鏈格孢(Alternaria tagetica)的形態(tài)明顯不同,與侵染菊科植物的鏈格孢(Altemaria sonchi)類似,但有關(guān)其它鏈格孢為害萬(wàn)壽菊的報(bào)道還未見(jiàn)諸于文獻(xiàn)。有關(guān)種類有待于進(jìn)一步深入斫究。
3小結(jié)
通過(guò)本次調(diào)查和病原菌鑒定,初步確定引起萬(wàn)壽菊葉枯病的病原是真菌鏈格孢(Alternaria sp.)。進(jìn)一步摸清了甘肅省武威黃羊河農(nóng)場(chǎng)、古浪、白銀地區(qū)景泰縣萬(wàn)壽菊葉斑病的病害發(fā)生、分布、為害情況。調(diào)查結(jié)果表明,該病在上述地區(qū)普遍發(fā)生,發(fā)病率一般在50% - 80u/0,輕者也有20%,嚴(yán)重地塊達(dá)到95%。發(fā)病率高,但早期沒(méi)有引起重視的原因是:萬(wàn)壽菊栽培密度較大,早期不易被發(fā)現(xiàn)。在調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn),所有底部葉片幾乎都有葉斑發(fā)生,說(shuō)明葉斑病在早期就發(fā)病普遍,只是在生長(zhǎng)后期才為害植株上部,導(dǎo)致花器、心葉枯死。所以應(yīng)注意及早觀察底部葉片的發(fā)病情況,以便及時(shí)有效地實(shí)施防治。
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