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影響蘆薈培養(yǎng)技術(shù)的幾個(gè)因素

2013/4/16 18:15:57

蘆薈的組織培養(yǎng)是推動(dòng)蘆薈產(chǎn)業(yè)化種植的重要方面之一,在蘆薈組織培養(yǎng)中,使用的生長(zhǎng)素類(lèi)有吲哚丁酸(IBA)和萘乙酸(NAA),細(xì)胞分裂素類(lèi)使用較多的是6-芐氨基嘌呤(6-BA),(玉米素)ZT和(激動(dòng)素)KT使用較少。不同品種的蘆薈、不同部位外植體,對(duì)生長(zhǎng)素的種類(lèi)和濃度要求也不同。因此,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的使用情況較為復(fù)雜,但大致遵循以下規(guī)律:

生長(zhǎng)素類(lèi)物質(zhì)與細(xì)胞分裂素類(lèi)物質(zhì)搭配使用對(duì)芽的分化和增殖效果較好,而生根培養(yǎng)多數(shù)單獨(dú)使用IBA或NAA。在促進(jìn)側(cè)芽產(chǎn)生時(shí)往往使用較高濃度的細(xì)胞分裂素,在一定濃度范圍內(nèi),如使用高濃度6-BA可明顯促進(jìn)側(cè)芽產(chǎn)生,隨著6-BA濃度的升高,分化的芽也隨之增加。但是,6-BA在培養(yǎng)過(guò)程中存在一定程度的累積效應(yīng),過(guò)高濃度的細(xì)胞分裂素會(huì)抑制新芽的發(fā)生和生長(zhǎng),且導(dǎo)致培養(yǎng)材料變異的概率增大。適宜濃度的IBA比NAA更有利于芽的分化和增殖,有實(shí)驗(yàn)表明,在相同的6-BA濃度下,IBA作用比NAA更有效,增殖率較高,苗生長(zhǎng)粗壯,黃葉、畸形葉很少出現(xiàn),若培養(yǎng)基中不加IBA或其濃度過(guò)低,則芽變纖細(xì),不利移栽成活;但高濃度IBA明顯抑制了芽的分化。而在生根培養(yǎng)基中,IBA的生根效果通常要優(yōu)于NAA。

研究表明,活性炭對(duì)多數(shù)蘆薈種類(lèi)組培有促進(jìn)生根作用,在加有活性炭的培養(yǎng)基中,活性炭可以吸收根基有害物質(zhì),促進(jìn)生根作用。但活性炭的濃度不宜太高,過(guò)高則會(huì)吸附外源生長(zhǎng)素,進(jìn)而抑制生根作用。通常情況下,1mg活性炭大約能吸附100μg生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì),在不同的培養(yǎng)基中,活性炭的吸附能力也有所不同。此外,向培養(yǎng)基中添加一定濃度的腐殖酸、香蕉汁和蘋(píng)果汁等,可使腋芽提早萌動(dòng),提高腋芽的出芽率和增殖系數(shù),促進(jìn)組培苗的根系發(fā)育和葉片生長(zhǎng)。

在蘆薈的組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)條件不同也會(huì)產(chǎn)生很大的影響。在培養(yǎng)條件中,以pH最為重要。培養(yǎng)基的pH一方面對(duì)離體器官的形成和發(fā)育起著重要的作用,另一方面對(duì)芽的生長(zhǎng)、分化以及培養(yǎng)基的硬度有很大的影響。在偏酸性條件下(pH6.2)比較有利于分化形成愈傷組織,并進(jìn)一步形成不定芽;在中性至偏酸環(huán)境(pH6.2—7.0)下,比較有利于不定芽的分化增殖。培養(yǎng)條件中,另一個(gè)重要的因素是光照,包括光照強(qiáng)度和光照時(shí)間。光照對(duì)外植體的褐變有一定影響。蘆薈的組織培養(yǎng)一般在黑暗或弱光照的條件下進(jìn)行即可,光照過(guò)強(qiáng),外植體容易發(fā)生褐變。

另外,溫度也是影響蘆薈組織培養(yǎng)的一個(gè)重要因素,蘆薈的組織培養(yǎng)通常在25℃條件下進(jìn)行,溫度過(guò)高或過(guò)低均易導(dǎo)致褐變的發(fā)生。通常在組織培養(yǎng)過(guò)程中加入抑制劑和吸附劑來(lái)減輕或避免褐變的產(chǎn)生。常用抑制劑有Vc、半胱氨酸、硝酸銀等,其中硝酸銀的抗褐變效果較好,當(dāng)硝酸銀濃度為15mg/L時(shí),抗褐變效果最佳。此外,向培養(yǎng)基中加入活性炭,也可有效降低外植體的褐變。

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