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北蟲草的菌種配方?

2012/5/13 8:13:24

王老師:北蟲草的菌種配方是什么?

姓名:陳立 單位: 聯(lián)系電話:13596214762 2008-02-15

專家解答
陳立同志: 您好,北蟲草的制種工藝流程操作如下: 一、精選原材料 1、母種培養(yǎng)基選料:瓊脂要無雜質(zhì),銀白色干燥的。馬令薯無霉爛變質(zhì),去皮和挖去芽眼。葡萄糖是選用普通的;還要少量的蛋白胨;磷酸二氫鉀,硫酸鎂等。 2、原種培養(yǎng)基選料:蛋白胨、葡萄糖、磷酸二氫鉀,硫酸鎂只是普通的,蠶蛹粉不要霉變受潮的,要干燥新鮮的。 3、栽培原料:大米、蠶蛹粉要新鮮,干燥,無霉變,葡萄糖是普通的等。 二、工具器材種植北蟲草需要玻璃試管、棉花、塑料箱、殺菌鍋、攝子、天平、菌種瓶、接種箱,接種針、酒精棉花、消毒劑、培養(yǎng)室架、控溫設(shè)備等。 三、北蟲草母種制法及培養(yǎng) (一)一級母種培養(yǎng)基配制方法洗凈玻璃試管,稱好各種原材料,先把馬令薯洗凈削皮去芽眼,然后切片,放在鋁鍋燒煮。按水的比例加20%切片后的馬令薯,煮開后保溫20分鐘,再用6層紗布過濾,捏緊渣汁,去渣,再補足水份原等量。再把按各2%剪碎的瓊脂,葡萄糖,蛋白胨,磷酸二氫鉀、硫酸鎂等微量元素按比例原料倒入鍋內(nèi),文火溶解后再過濾。此時就可分裝玻璃試管。每支試管裝量1/5。擦凈管口,塞好棉塞,再放在滅菌鍋消毒。 當消毒鍋固緊蓋后立即加熱升溫至0.5公斤/公分2后。即放凈冷氣降壓至0后,重新升溫至1.2公斤/公分2,文火保溫30分鐘,然后開蓋冷卻至常溫,乘熱進行三分之二斜面面積。隔2天后,觀察玻璃管的冷凝水回落在底面,觀察平面仍很平坦和無雜菌叢生就可等待接種。 (二)一級母種的接種方法如果確定母種轉(zhuǎn)管后接種的母種。先消毒接種箱,再消毒母種試管和其它器具。其方法是將所用的母種試管、接種工具全部放進接種箱內(nèi),關(guān)好箱的門窗,再將消毒氣化劑立即放進箱內(nèi)汽化,迅速關(guān)好門窗手筒窗,待氣化后半小時就可準備接種。 接種的方法是先把母種外表、器皿具在點燃的酒精燈上消毒8-10秒鐘時間,再把母種試管口對準酒精燈火焰,并把棉塞輕輕拉出。再用接種鏟把菌種劃成數(shù)段,然后用接種刀按數(shù)段的接種段片再劃成米粒大少的菌種移植在新的試管斜面中間培養(yǎng)基上。最后把原來的棉塞在酒精燈上消毒3秒鐘后迅速塞回試管口,這樣就完成一支母種試管接種的工作任務(wù),以后就按此方法順序類推接種。 (三)北蟲草母種發(fā)菌管理方法 當北蟲草母種移植在PDA培養(yǎng)基上后,立即將接好的菌移送在23℃左右的溫室里恒溫培養(yǎng)。經(jīng)過5-7天的適宜溫度發(fā)菌,所接入的菌種開始萌發(fā)菌絲。并向斜面周邊延伸生長。此時就檢查所接入的菌種周圍有否雜菌生長?一旦發(fā)現(xiàn)雜菌立即揀出去掉。到了12-15天后,蟲草母種的菌絲在適宜的溫度已經(jīng)長到斜面試管2/3面積時,這時候室溫降至22℃左右,目的是使菌絲緩慢生長,起到復(fù)壯的作用。到了20天以后,整個菌絲布滿斜面,等3-5天后就可接北蟲草原種了。 四、北蟲草原種培養(yǎng)技術(shù)方法 當北蟲草母種培養(yǎng)成功后,就可以培養(yǎng)北蟲草原種,具體培養(yǎng)方法是: (一)培養(yǎng)基配方: ①玉米粉1%;②葡萄糖2%;③蛋白胨1%;④酵母粉0.5%;⑤磷酸二氫鉀0.1%,水95.35%;⑥硫酸鎂0.05%;⑦PH值調(diào)至6.5左右。 (二)培養(yǎng)方法 ①制作原種培養(yǎng)基:將這些原料溶于水后裝在500毫升玻璃瓶中,每個玻璃瓶裝量150毫升,然后用8層紗布做成蓋蓋住瓶口扎緊,立即放在高壓滅菌鍋內(nèi)進行消毒,待壓力表上升至0.5公斤/公分2壓力時,即放凈冷氣的指針降至0后,再關(guān)掉放氣閥門,待溫度表指針逐漸上升至1.2公斤/公分2后就開始保溫45分鐘后,慢慢下降指針至0,然后開蓋冷卻至常溫,再移入接種箱等待接種。 ②原種接種方法:先把已消毒好的北蟲草液體原種培養(yǎng)基移放進接種箱內(nèi)。并把北蟲草母種和接種勾,酒精燈,消毒棉等接種物也放在接種箱內(nèi)。此時就開始在接種箱內(nèi)剪開氣化消毒劑,立即關(guān)閉所有接種箱內(nèi)門、窗、手筒口等處密閉消毒。待半小時后,接種人員就可把手伸進手筒口進行接種。接種的方法是,點燃酒精燈,左手拿著母種試管對準火焰口,右手拿著鐵勾在酒精燈火焰消毒3-5秒種后立即伸進母種試管內(nèi)把菌種分成5-7段,再用左手迅速將紗布瓶蓋打開,右手即把一段菌塊勾入瓶內(nèi)速將瓶蓋按原樣蓋緊。第二瓶接種的方法隨第一瓶一樣同。 當每箱的北蟲草原種接好后,就迅速移入24-26℃恒溫培養(yǎng)室里發(fā)菌培養(yǎng)。經(jīng)過適宜的溫度5-6天的發(fā)菌培養(yǎng),栽培者要檢查北蟲草菌液的顏色為深棕色,瓶口聞有很濃的北蟲草氣味,就能辨別出菌種的優(yōu)劣質(zhì)量。如有發(fā)菌瓶內(nèi)濃度低、氣味臭,并有五顏六色的菌液,就是有雜菌污染的菌液,堅決不能用。如果用上去,待長出的不是北蟲草,而是雜菌。 以上內(nèi)容,僅供參考。

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