佛肚竹(Bambusa ventricosa)分布于廣東、廣西,福建等地多栽培為庭園觀賞,是極美觀的觀賞竹種.近年來在福建省南平市栽植的佛肚竹,枯萎病時有發(fā)生,造成較大的經濟損失.
1 材料與方法
1.1 病原菌的分離 從野外采集病株,在室內按常規(guī)法進行組織分離和純化,再經分生孢子單孢分離獲得純菌種 J.
1.2 接種試驗 將純菌種在PSA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7~9 d,待形成大量成熟分生孢子后,用無菌水配成分生孢子濃懸 浮液(含菌絲).選擇佛肚竹健株靠近地面的稈基,用下列方法:稈基枝痕傷口、割傷稈基、燒傷稈基、 無傷稈基進行野外涂抹接種,以無菌水處理作為對照,濕脫脂棉保濕48 h,定期觀察癥狀出現.
1.3 病原菌培養(yǎng)性狀觀測 將供試菌種切取直徑1 cm的菌絲塊,分別移人不同成分的培養(yǎng)基中,置28℃下恒溫培養(yǎng),逐日觀 察記載,試驗設3個重復.
1.4 發(fā)病規(guī)律觀測 按常規(guī)法定點定時觀察病害癥狀的發(fā)展、病菌越冬場所、傳播方式、侵染途徑和影響病害發(fā)生的環(huán)境因子 j.
1.5 室內抑菌藥劑篩選 選擇75%百菌清、70% 甲基硫菌靈、50%多菌靈、耐克銅、30%氧氯化銅、50%代森錳鋅、80% 代森鋅、可殺得2 000、50%撲海因、50%消菌靈等10種藥劑,用載玻片萌發(fā)法測定藥劑對病原菌孢子 萌發(fā)的抑制作用 J,用1.3的方法測定藥劑對病菌菌絲的抑制作用.試驗設3個重復.
2 結果與分析
2.1 癥狀 病株最初在靠近地面的稈基竹節(jié)枝 條脫落痕傷口溢出粉紅色的粘液,并在 竹節(jié)的上下方粘結成粉紅一桔紅色子座. 子座表面凹凸不平,成丘狀,山脊狀突 起,邊緣不整齊(圖1:1—2).隨著稈基 部子座不斷擴展,上部竹葉逐漸脫落, 最后全株枯萎.剖開竹腔,維管束變褐, 并具臭味,整個竹腔內布滿白色菌絲. 但病株的根系完整無病變.后期(3月下 旬)子座逐漸變?yōu)轷r紅色,并在突起部 分出現許多淺褐色的小突起,即病原菌 的有性階段子囊殼.
2.2 病原菌鑒定
2.2.1 接種試驗人工接種試驗結果表 明:除對照、無傷和燒傷接種不發(fā)病外, 稈基竹節(jié)枝痕傷口、割傷稈基2種方法 均能發(fā)病,發(fā)病率分別為61.54和 56.25.接種后出現的癥狀與自然發(fā)病的 癥狀一致,從接種發(fā)病的植株再分離獲 1—2 稈基癥狀;3.從生子囊殼(45×);4.子囊殼(120×); 5.子囊(120×);6.子囊孢子(180×);7.大型分生孢子(18O×) 圖l 病害癥狀和病原菌形態(tài)特征 Figure 1 Symptt)m of disease and Morphology of pathogen 得原菌種,證實分離菌是枯萎病的致病菌.病害的潛育期7—13 d,20 d后表現典型的癥狀.
2.2.2 有性階段形態(tài) 取自然感病與接種發(fā)病的竹節(jié)處淺褐色小突起的子座,作成切片觀察.子囊殼 成叢埋生于子座中,子囊殼球形或略呈扁球形,桔紅色至鮮紅色,直徑66.70~193.43 m,子囊殼壁 分層不明顯,子囊殼孔口呈乳頭狀突出子座.子囊束生于子囊殼基部,無側絲;子囊棍棒狀,頂端有 孔口,基部具一短柄,大小為(40.92~61.79)I,zm X(3.67~6.68) m ,內含8個子囊孢子成單行斜 列;子囊孢子無色、雙胞、紡綞形至梭形,成熟孢子具有2個油滴,在隔膜處稍內縮,大小為(7.52— 13.36)Ixm ×(3.51~6.01)p.m (圖1:3~6).
2.2.3 無性階段形態(tài)病菌在PSA培養(yǎng)基上生長旺盛,氣生菌絲叢卷毛狀,初形成白色菌落,邊緣整 齊,后期有少量紫紅色素產生.培養(yǎng)3 d后開始產孢,7 d后產生大量大型分生孢子,大型分生孢子梭 形一鐮刀形,壁與隔膜都較厚,成熟時l~5個分隔,以3個分隔的為多.多數分生孢子幾乎平直,少 數稍彎曲,兩端細胞均勻地逐漸狹細,基部無腳胞.1分隔分生孢子大小為(8.35~18.70) X (2.67 ~ 4.18) m ,2分隔為(13.46~25.99)I,zm X(2.67~4.29) m ,3分隔為(15.20~38.66)I,zm X (3.20~5.33) m ,4分隔為(24.38~44.90)I,zm X(3.67~5.18) m,5分隔為(31.57~48.43) m X(4.01~5.85)I,zm(圖1:7). 根據上述特征,病菌有性階段鑒定為鮮紅叢赤殼菌Nectria ditissima Tu1.,無性階段為半裸鐮孢霉 Fus口ri m semitect m Berk.& Rav. 一 .
2.3 病原菌在不同培養(yǎng)基上的生長性狀 在28 cC下,半裸鐮孢霉在PSA培養(yǎng)基和PSA+10%佛肚竹竹稈煮汁培養(yǎng)基上生長最佳,菌絲層厚
2.4 發(fā)病規(guī)律觀測
2.4.I 病原菌越冬場所對佛肚竹枯萎病發(fā)病區(qū)進行的定點觀察結果表明,7—8月病竹上的子座已全 部消失.9月以后對病竹殘枝和林下土壤取樣鏡檢,未見有枯萎病菌的分生孢子、子座和子囊孢子,但 可見大量的菌絲,用PDA培養(yǎng)基25 c【=下培養(yǎng)7 d,可長出典型的半裸鐮孢霉菌落和分生孢子.另外, 對從野外采回并在5 c【=冰箱中和室溫下保存5個月之久的子座搗碎,收集子囊孢子進行發(fā)芽力測定,結 果顯示子囊孢子已喪失萌發(fā)能力.因而可以證實病原菌是以菌絲在病竹殘枝和土壤中越冬.
2.4.2 病原菌孢子的傳播2~5月在發(fā)病區(qū)以東、西、南、北4個方向,按上、中、下3個部位分別 掛上涂有白凡士林薄層的載玻片,24 h后取回鏡檢,每玻片隨機檢查10個視野,統(tǒng)計分生孢子數,結 果見圖2.在孢子的捕捉過程中,一般晴天捕捉孢 子量少,雨天多,風雨交加的天氣則可捕捉到更多 的分生孢子.另外下部比中上部可捕捉到更多的分 生孢子.可見,病菌的分生孢子是由風雨傳播的. 子囊孢子成熟后即可萌發(fā).當出現連續(xù)幾天的陰雨 天氣時,子囊孢子便會萌發(fā)產生菌絲,不久菌絲體 上便形成產孢結構,產生分生孢子.
2.4.3 癥狀發(fā)展 對佛肚竹枯萎病的定點定期觀 測可知,病害從2月下旬至3月初開始發(fā)病,3月 上旬一4月中旬霉雨季節(jié)為發(fā)病高峰期,5月中下 旬停止蔓延.
2.4.4 病害發(fā)生與凍害的關系 據南平市氣象站 近年極端氣象資料統(tǒng)計分析,南平地區(qū)每年從12日期 圖2 病原菌孢子的傳播 Figure 2 Dissemiuatiou of BDoreB 月一3月,極端低溫在一3—0 oC之間,局部地區(qū)可達一5 c【=.在調查中發(fā)現,佛肚竹受凍害嚴重的地 方,枯萎病嚴重發(fā)生,株發(fā)病率高達90%一95% ;而未受凍害的佛肚竹則未見有枯萎病的發(fā)生.因此, 佛肚竹枯萎病的發(fā)生,主要是因佛肚竹受極端低溫嚴重凍害之后,導致兼性寄生的鐮孢霉侵染為害.
2.5 室內抑菌藥劑的篩選 1 000~4 000倍液的代森錳鋅、百菌清、消菌靈、可殺得、代森鋅、氧氯化銅、甲基硫菌靈、耐克 銅,以及1 000倍液的多菌靈能抑制病菌分生孢子的萌發(fā).1 000~4 000倍液的代森錳鋅、百菌清、消菌 靈、撲海因、代森鋅、甲基硫菌靈、多菌靈能抑制病菌子囊孢子的萌發(fā).500一I 500倍液的可殺得和氧 氯化銅、500一l 000倍液的耐克銅能抑制病菌菌絲生長(表2).
2.6 佛肚竹枯萎病的防治 由于佛肚竹枯萎病是由凍害而導致土壤習居性的兼性寄生菌鐮孢霉侵染所致,因此可采取以下措施防治:
(1)應選擇朝陽面,地勢平緩的地方種植,加強撫育管理,及時除草,高墩式培土以利排水,促 進佛肚竹生長勢,增強抗寒和抗病力.
(2)對病竹在離地面15~20 cm處鋸去上部枯萎竹桿,在鋸斷面 及桿基用代森錳鋅、百菌清等殺菌劑涂抹,防止病菌感染,然后在竹兜周圍挖溝,撒生石灰0.5 kg,再 培土,效果很好.(3)注意天氣變化,及時采取防寒防凍措施,是防止佛肚竹枯萎病發(fā)生的有效手段.
3 討論
佛肚竹枯萎病病原菌有性階段為鮮紅叢赤殼菌Nectria ditissima,無性階段為半裸鐮孢霉Fusarium semitectum.據文獻記載,引起佛肚竹枯萎病的病原菌還能危害番茄、茄、玉米、荸薺等作物 J,以 及蘋果、樺、櫟、槭、菩提樹、赤楊、槐和榛等闊葉樹 和麻竹¨ ,而佛肚竹為其新寄主.佛肚竹枯 萎病病原菌的無性階段半裸鐮孢霉是土壤習居性的兼性寄生菌,它以菌絲體在土壤、病竹殘枝上越冬. 2月下旬至3月初借風雨傳播,從莖基竹節(jié)傷口侵入.3月上旬~4月中旬霉雨季節(jié)為發(fā)病高峰期,5月 中下旬病害停止蔓延.凍害是誘導病害發(fā)生的主要因素.加強撫育管理,防寒防凍是防病的根本措施.
(福建農林大學林學院,福建福州350002