驅(qū)蚊香草的莖尖培養(yǎng)與快速繁殖

2012/5/10 9:23:32

驅(qū)蚊香草是天竺葵科天竺葵屬多年生常綠草本轉(zhuǎn)基因植物。它不僅能天然揮發(fā)出香茅醛、香茅醇等物質(zhì)有效驅(qū)除蚊蟲，還能散發(fā)出檸檬香氣凈化空氣，其主莖柔軟，可以塑造各種盆景供觀賞。驅(qū)蚊香草能正常開花，但不能自然繁育。在實踐中證明扦插成活率低，并且其功能逐代衰退。采用莖尖離體培養(yǎng)技術(shù)能有效地保持驅(qū)蚊香草種性穩(wěn)定并能快速增加幼苗數(shù)量，具有成本低、時間短、繁殖系數(shù)高等優(yōu)點。
（一）材料和培養(yǎng)條件
1.材料：驅(qū)蚊香草莖尖。
2.培養(yǎng)條件：MS為基本培養(yǎng)基。（1）起始和增殖培養(yǎng)基：MS+硝酸銨800mg/L（單位下同）+磷酸二氫鈉，H2O150+赤霉素1+KT8+IAA1；（2）生根培養(yǎng)基：1/2MS+Fe鹽5ml+NAA0.2；培養(yǎng)基均加蔗糖3％、瓊脂0.6％，pH5.6，121℃、0.11MPa下滅菌25分鐘。培養(yǎng)溫度25（±1）℃，光照12小時/日，光照度2000Lx。
（二）生長與分化情況
1.無菌材料的獲得：選取健壯的驅(qū)蚊香草幼苗，去掉莖尖，移植到經(jīng)消毒的盆土中室內(nèi)培養(yǎng)。15～20天后，取腋芽上長約1.0cm的新生莖尖為外植體。去掉展開幼葉，流水沖洗1～2小時，置超凈臺上用70％酒精處理10～15秒，無菌水沖洗2～3次，0.1％高汞鹽消毒10分鐘，無菌水再次沖洗4～5次。無菌條件下用無菌濾紙將材料表面水分吸干，在雙筒解剖鏡下剝?nèi)∏o尖，將具有2個最幼小葉原基的莖尖接種于起始培養(yǎng)基上。若出現(xiàn)褐化及時轉(zhuǎn)接，轉(zhuǎn)接2～3次即不再有褐化。接種5～7天后莖尖萌發(fā)生長，15天左右可長到高0.5～2cm、帶1～2片葉的叢生芽，25天后繼代轉(zhuǎn)移進行腋芽增殖。
2.腋芽增殖：將上述叢生芽剪切成帶1～2個芽的芽塊，去掉基部愈傷組織后，接種到增殖培養(yǎng)基上。培養(yǎng)30天左右，每個芽塊的腋芽又萌發(fā)成長3cm左右，具4～6片葉的叢生芽。這樣重復(fù)繼代增殖，每個初始培養(yǎng)的叢生芽繁殖15代左右，即可得到大量組培苗。
3.生根與煉苗：無菌條件下切取叢芽中高3cm左右的壯芽轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20天后不定根開始大量形成，每株平均生根8條以上，生根率達95％以上。為讓試管苗逐漸由異養(yǎng)生長向自養(yǎng)生長過渡，打開瓶口倒入20℃溫水至1.5cm左右深保濕防污，煉苗4～6天后小心取出，洗凈根部瓊脂進行移栽。
4.移栽：移栽前將草炭土和珍珠巖按2∶1混合并進行滅菌處理，選擇氣候溫和的時間移栽入混合基質(zhì)。移栽時用生根粉ABT150mg/L+細土100g/L的溶液浸漬20分鐘。緩苗后定期追施1/2MS大量元素的水溶液，注意溫度、濕度、光照及水肥管理，移栽成活率可達90％以上。

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