花卉植物無菌接種組培技術(shù)

2012/5/3 14:03:04

花卉植物無菌接種組培技術(shù)-- 1、外植體的選取及預(yù)處理 ⑴外植體選取 選取生長健壯、已發(fā)芽、長勢較好、無病害的植物帶芽的枝條作為外植體。 ⑵材料預(yù)處理 取帶芽的枝條，用洗衣粉適量沖洗，然后扳取或用清潔剪刀剪取帶芽部位（約1cm×1cm大�。�，頂芽和腋芽、大芽和小芽分開。繼續(xù)用洗衣粉清洗10分鐘，清洗時需不�；蝿�。再用自來水沖洗干凈，置空培養(yǎng)瓶備用。 2、外植體消毒 ⑴蒸餾水沖洗 外植體置于已殺菌開機的超凈工作臺上，新潔爾滅洗液消毒雙手，用無菌蒸餾水清洗外植體2-3次，需晃動。 ⑵酒精消毒 75%酒精倒入裝外植體的容器內(nèi)，消毒外植體30-60s，時間長短視植物材料情況而定。動作一定迅速，需晃動。然后將酒精倒去。 ⑶升汞消毒 1%生汞倒入裝外植體的容器內(nèi)，消毒外植體5-10min，時間長短視情況而定。需晃動，在最后3min靜置，升汞注滿容器，將已灼燒的鑷子放入容器升汞內(nèi)浸泡。 ⑷蒸餾水清洗 用鑷子將外植體取出，放入另一無菌蒸餾水瓶中清洗，反復(fù)清洗4次。 ⑸莖尖的剝離 用灼燒冷卻的鑷子和剪刀對外植體進行處理，剝離外植體材料芽外部小葉片，露出尖端生長點和2-3片葉原基部分，將此部分剪下做培養(yǎng)材料。再用無菌蒸餾水清洗3-4次。 ⑹接入培養(yǎng)基 培養(yǎng)基瓶放入工作臺內(nèi)，將剝離的材料分別用消毒過的鑷子放入培養(yǎng)瓶內(nèi)，蓋上瓶蓋，置培養(yǎng)籃內(nèi)，寫上培養(yǎng)時間、操作人及培養(yǎng)品名，入培養(yǎng)室培養(yǎng)。

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