大巖桐組培繼代技術(shù)

大巖桐傳統(tǒng)繁殖方法為播種法、扦插法、分球法等。大巖桐種子極小，每克種子有2．5萬(wàn)粒至3萬(wàn)粒，壽命較短，僅兩個(gè)月左右。播種繁殖對(duì)土壤條件要求高，操作精細(xì)，且易發(fā)生性狀變異、品種退化現(xiàn)象；扦插法雖可保持原品種特性，但繁殖系數(shù)較低，不能適應(yīng)大批量生產(chǎn)的需要；分球法形成的植株又多具有株形不整齊的缺點(diǎn)，生產(chǎn)上亦不常用�；谝陨显�，我們從1998年開(kāi)始嘗試用組培法繁殖大巖桐，基本上找到了適合大巖桐誘導(dǎo)、分化和生根的培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件。
　　材料與方法供試材料為候毛大巖桐。剪取成年植株的幼葉，用流水沖洗半小時(shí)，在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒處理。首先將經(jīng)過(guò)消毒處理的植株幼葉放入75％酒精中浸泡30秒鐘，之后用0．1％的氯化汞溶液處理5分鐘至8分鐘，最后用無(wú)菌水沖洗4次備用。以MS為基本培養(yǎng)基，附加蔗糖30克／千克、瓊脂6克／千克及不同種類和濃度的激素，在PH值為5．8、溫度為18℃至20℃條件下進(jìn)行誘導(dǎo)、分化、生根培養(yǎng)。
　　誘導(dǎo)和分化將消毒后的幼葉切成0．4平方厘米至0．5平方厘米的方形小塊，接種到附加2毫克／千克的6－BA、0．2毫克／千克的NAA的MS培養(yǎng)基上（芐氨基嘌呤BA為一種利于長(zhǎng)的細(xì)胞分裂素，荼乙酸NAA為一種促進(jìn)生根的生長(zhǎng)素）在25℃愈傷組織，40天后少數(shù)愈傷組織上可分化出幼芽。
　　繼代培養(yǎng)將愈傷組織塊上分化出的幼芽切下，轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基上，繼代培養(yǎng)基附加1毫克／千克的6－BA、0．1毫克／千克的NAA，培養(yǎng)溫度為25℃，每天在1000LX至2000LX光強(qiáng)下連續(xù)光照12小時(shí)。一周后幼芽發(fā)育，并在基部形成大量芽體，一般一個(gè)月可長(zhǎng)滿培養(yǎng)基面，一個(gè)月應(yīng)轉(zhuǎn)移一次。
　　生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)中苗高達(dá)2厘米，有3片至4片完整葉片的小植株，轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基為1／2MS，附加1毫克／千克的I－BA（IBA為一種生長(zhǎng)素）。培養(yǎng)條件與繼代培養(yǎng)一致，2周后有根長(zhǎng)出，可煉苗移栽。
　　煉苗與移栽影響大巖桐的移栽成活率的關(guān)鍵是控制好溫度和濕度，大巖桐要求生長(zhǎng)在高溫、潮濕及半陰環(huán)境，通風(fēng)不宜過(guò)分，要保持較高的空氣濕度。移栽前先閉瓶煉苗1周，洗凈根上附著的培養(yǎng)基，栽入裝有蛭石的營(yíng)養(yǎng)缽中，蛭石用0．5％的KMnO4消毒。搭塑料小拱棚保濕，棚上架遮蔭網(wǎng)，保持棚內(nèi)溫度20℃至25℃，兩周后逐漸揭開(kāi)塑料薄膜，一個(gè)月后可定植上盆，常規(guī)培養(yǎng)5月至6月即可開(kāi)花。
　　大巖桐組培快繁技術(shù)，比傳統(tǒng)的播種法、扦插法、分球法繁殖系數(shù)高，植株整齊一致，由于是無(wú)性繁殖，其性狀沒(méi)有明顯的分離。能保持原品種特色和降低繁殖成本。但繼代培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，同樣是在1毫克／千克的6－BA條件下，有部分試管苗發(fā)生玻璃化，失去分化能力，而低于1毫克／千克的6－BA，分化數(shù)量明顯減少，6－BA的適宜濃度有待進(jìn)一步探討。

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