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家庭環(huán)境下進行組培的探討與建議(上)

2011/8/10 9:04:10

植物組織培養(yǎng)技術,尤其是快速繁殖,并非只有專業(yè)人員和專業(yè)實驗室才能夠完成的。作為對多肉植物和組織培養(yǎng)有著濃厚興趣的愛好者,在充分利用家庭條件的基礎上,同樣可以制備出自己的試管苗來的。在我們進行多肉植物的栽培中認識到,一些比較名貴的園藝品種,比如:萬象、玉扇、壽、高紋鷹爪等十二卷屬品種,還是繽紛橄欖、何魯牽牛等塊莖類植物,甚至于星球屬、巖牡丹屬等等,這些植物的常規(guī)繁殖系數(shù)很低,他們都可以采用組織培養(yǎng)來解決其繁殖問題,并且可以得到相當數(shù)量的幼苗。對于奇想天外等種子萌發(fā)困難的植物,同樣可以借助組織培養(yǎng)來進行無菌播種。在進行組織培養(yǎng)過程中,不但可以對培養(yǎng)的植物有更深一層的認識,對常規(guī)的栽培有著相當大的意義。許多搞組織培養(yǎng)的專家,最初都不是專業(yè)學組培的,就是憑著興趣和探索精神取得輝煌成績的。關鍵是,愛好者有著濃厚的興趣,非凡的觀察力和細致入微的操作,這些都可以彌補非專業(yè)的缺陷,并且可以充分利用日常生活中的各種可利用資源,這些就足以讓愛好者在家庭環(huán)境下完成組織培養(yǎng)了。同時這也不僅僅滿足了自己的興趣,還可以有一定的經(jīng)濟收益,甚至可以有所創(chuàng)新和發(fā)明。

一、如何解決場地和基本設備:

進行組織培養(yǎng),沒有一定的設備是無法開展的。正規(guī)實驗室的組織培養(yǎng)設備是昂貴的,不適合家庭消費,但如果能有途徑買到廉價的實驗室設備,那就在好不過了。如果沒有辦法搞到實驗室設備,就不妨動手自己制作一些簡單的設備。

1.無菌操作的主要設備——接種箱和壓力鍋:

接種箱:植物組織培養(yǎng)的主題操作需要在一個相對密閉的無菌環(huán)境中進行。那么說我們首先要創(chuàng)造一個密閉的環(huán)境,可以利用一些木料、塑料板、有機玻璃、鋁合金骨架等等廉價的材料,動手粘合一個小巧的接種箱。具體的參數(shù)可以找一本“食用菌栽培”的書籍,模仿種蘑菇的接種箱做一個即可。需要注意的是,組織培養(yǎng)的接種箱的密閉性要求比較高,盡量避免腐朽的木材和易生銹的材料,箱子的頂端按放兩盞燈:20w的紫外線燈和20w的日光燈。箱體的周邊盡量采用玻璃材料,因為這樣便于觀察,有時候接種箱還可以借用為培養(yǎng)箱,周邊采用玻璃材料更方便于觀察和培養(yǎng)。


高壓鍋:主要用來對培養(yǎng)基和其他材料的滅菌。在實驗室通常使用醫(yī)用高壓滅菌器,然而在家庭要充分利用廚房使用的高壓鍋,高壓鍋的壓力要低于滅菌器,但是適當延長滅菌時間,還是可以取得較好的效果的。比如:對培養(yǎng)基滅菌40分鐘就基本上可以達到滅菌效果(滅菌器是20分鐘);無菌水采用間歇滅菌法,先用高壓鍋壓40分鐘,放置24小時,再壓20分鐘即可達到效果。

2.場地:

這個就因人而易了,總體的要求就是進行組織培養(yǎng)操作的地方要盡量無塵,減少空氣流動,最好有一定的陽光。比如書房、寫字間都可以用來進行無菌操作。

進行培養(yǎng)基的配制可以借用一下廚房,但所使用的器具必須和廚具分開。一般說,組織培養(yǎng)中的幾乎全部化學物質對人體是無害的,除了少數(shù)激素類物質和滅菌劑。對于有毒害的物質,需要認真保管,以免發(fā)生危險。

3.輔助設備:

主要指冰箱,它是用來儲存化學物質和培養(yǎng)基的。天平,可以采用感量在100克的托盤天平,甚至用中藥的藥衡都可以代替。培養(yǎng)架,這個就更簡單了,采用鋁合金-玻璃的培養(yǎng)箱既可以滿足要求,如果日光不足,可配合日光燈補光等。

4.化學試劑:

化學試劑是不可缺少的,因為組織培養(yǎng)的核心就是培養(yǎng)基的成分,而并不是簡單的無菌操作。一些用量較大的化學物質是有必要買的,比如大量元素(硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、高錳酸鉀、甲醛、酒精、白砂糖、瓊脂等等。微量元素和有機復合物不需要購買,因為它們的用量很小,我們可以用蔬菜浸汁或者馬鈴薯浸汁來代替。激素是必不可少的,他們的稱量需要借助分析天平,但這是家庭條件所不允許的,如果有條件可以借助關系單位代替配成母液,每次取一些使用即可。最好的辦法是到農(nóng)資商店(賣農(nóng)藥化肥的地方),它們一般出售農(nóng)業(yè)用的激素,有的是用安瓿裝的,按照一定的比例加入到培養(yǎng)基當中即可。近幾年來,有些化學品公司開始生產(chǎn)植物組織培養(yǎng)基原粉,只需要稱取一定量加水即可,很方便。比如泛生化學品公司生產(chǎn)的ms原粉,只需要稱量

40克,加1升水,用微波爐加熱5分鐘即可分裝,相當簡便。

消毒劑通常采用氯化汞(劇毒),如果不容易搞到,可以用漂白粉代替。調(diào)節(jié)酸堿度時,可以采用家庭常用的純堿和白醋。

5.培養(yǎng)容器和玻璃儀器:

組織培養(yǎng)的容器要求并不高,只要玻璃顏色為透明色即可(鈉玻璃不可以)。

我們可以到垃圾站去看看,撿回一些廢舊的果醬瓶就可以了。比較好用的是阿香婆辣醬瓶,我們實驗室也是采用的這種瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可,如果不好找到,可以采用微波爐專用的錫箔紙甚至方便面的袋子,折疊成雙層,用橡皮圈固定即可。

其它玻璃儀器,比如燒杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替;一些度量儀器,如量筒和移液管最好到玻璃儀器商店購買,恐怕花不了20元錢就可以配置一套相當棒的組培玻璃儀器。

6.其它:

還有一些用品是必需的。比如精密ph試紙(5.4~7.0),需要買一本,大約花1.5元即可搞定;酒精燈也不需要買,用墨水瓶配上一個玻璃環(huán),再加上一個棉花芯,最后用農(nóng)夫山泉礦泉水的瓶蓋做燈冒,這樣的酒精燈很小巧,適合接種箱使用。刀子剪子鑷子是必需的,到花市的工具攤位上,花10元錢全部搞定,注意選比較小巧的工具。

關于用水,按理說應該使用蒸餾水,但是我們家庭飲用的純凈水比蒸餾水還要純,那么說借用一些飲用水就可以了。我們曾經(jīng)采用康師傅純凈水進行動物細胞的培養(yǎng),效果都是很不錯的,更何況于植物細胞培養(yǎng)了。

以上是組織培養(yǎng)的基本設備和試劑,主要突出了他們相關的替代品,因為作為組織培養(yǎng)中的快速繁殖,它的要求是相當?shù)偷摹N覀兊募彝ヅ囵B(yǎng)和工廠化是不同的,工廠化生產(chǎn)組培苗要追求高增殖率,所以它的要求就比較精細和標準。我們的家庭培養(yǎng)則不需要那么準確,只要達到培養(yǎng)成功的目的即可。當然,如果想提高增殖倍率和試管苗的品質,必須盡量貼近實驗室的用具和器材,代用品總是有一定的缺陷的。

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