墨蘭組織培養(yǎng)

組織培養(yǎng)就是根據(jù)植物細(xì)胞具有的全能性、再生能力和分生能力．從蘭株體上取下莖尖分生組織，接種到培養(yǎng)基上，在無(wú)菌條件下，利用玻璃容器進(jìn)行培養(yǎng)，使其形成新植株的方法。此方法是快速繁殖和保存種質(zhì)材料及培育無(wú)病毒苗的一種好方法，是現(xiàn)代最先進(jìn)的繁殖方法。
　　一、組織培養(yǎng)的優(yōu)越性
　　
　　1、能夠保持母本的優(yōu)良性狀，使上一代的優(yōu)良性狀穩(wěn)定地遺傳下來(lái)。
　　
　　2、節(jié)約繁殖材料，采用一小部分莖尖、側(cè)芽、幼葉尖、休眠芽或花序，就能繁殖出大量的中國(guó)蘭花。
　　
　　3、快速。從優(yōu)良的母本取一小塊組織，在合適的條件下經(jīng)過(guò)離體培養(yǎng)，一年之內(nèi)就能繁殖出上萬(wàn)蘭苗。例如，將墨蘭初生莖的頂芽切割成2～3毫米，在一年內(nèi)就能繁殖出上萬(wàn)甚至幾十萬(wàn)株幼苗。
　　
　　4、節(jié)省土地。組織培養(yǎng)的材料是三角瓶或試管，可以充分利用空間。例如，一間30平方米的培養(yǎng)室就能擺放1萬(wàn)多個(gè)三角瓶，可繁殖幾萬(wàn)株苗，且周轉(zhuǎn)快，全年均可連續(xù)培養(yǎng)。
　　二、組織培養(yǎng)的設(shè)備設(shè)施
　　
　　組織培養(yǎng)的設(shè)備包括準(zhǔn)備室、接種室和培養(yǎng)室。具體設(shè)備有晾干架、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、藥品柜、冰箱、PH計(jì)、高壓消毒鍋、培養(yǎng)基分裝器、烘箱、溫箱、攪拌器、離心機(jī)、電爐、蒸餾器、天平、軟木塞打孔器、溫濕調(diào)節(jié)設(shè)備、日光燈、培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)床、培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、接種箱、搖床、燒杯、培養(yǎng)皿、三角瓶、量筒、滴管、移液管、針筒、定容瓶、鑷子、試管、剪刀、解剖刀、接種針。
　　三、組織培養(yǎng)的操作方法
　　
　　1、植物材料的滅菌及切取
　　
　　從墨蘭組織培養(yǎng)的外植體均取自分生組織，最常用的為莖尖。莖尖的切取應(yīng)在無(wú)菌接種室的超凈工作臺(tái)上完成。選擇生長(zhǎng)旺盛的植株，剝?nèi)ト~片，取下莖尖。先用無(wú)菌水清洗干凈，除去殘留的鞘、葉基等，再用70%～75%酒精浸泡10～30秒，取出后在5%～10%的漂白粉溶液中浸10～15分鐘，再用無(wú)菌水沖洗干凈，在實(shí)體顯微鏡下挑出莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)，立即接種到試管里的培養(yǎng)基上。
　　
　　2、培養(yǎng)基的配制
　　
　　用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基與用于種子萌發(fā)的培養(yǎng)基基本上相似，但也不盡相同。下面介紹一種蘭屬植物適用的培養(yǎng)基，以供大家參考。
　　
　　培養(yǎng)基配方：花寶l號(hào)含量：3克，香蕉含量：30克，蛋白胨含量：2克，蘋(píng)果含量：20克，甘氨酸含量：0.02克，蔗糖含量：25克，肌醇含量：0.1克，甘露醇含量：1克，卡基腺嘌呤含量：0.002克，瓊脂含量：12克，腺嘌呤含量：0.002克，椰子水含量：50亳升，蒸餾水含量：加至1000毫升。
　　
　　3、培養(yǎng)原球體
　　
　　接種30～45天后．形成小而圓的原球體。將原球體一分成四，放到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，30～60天后，又可長(zhǎng)出原球體，按照上述方法重新培養(yǎng)，這樣，在短時(shí)間可獲取大量的原球體。
　　
　　4、旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)
　　
　　將原球體切割成組織，放入試管內(nèi)的液體培養(yǎng)基中，立即放于旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)床上旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。
　　
　　5、分化培養(yǎng)
　　
　　在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)床上培養(yǎng)一段時(shí)間后，小塊稍微長(zhǎng)大，取出接種在分化培養(yǎng)基上，放于分化室中培養(yǎng)15天左右，逐漸長(zhǎng)出芽和根，進(jìn)一步形成蘭花小植株。
　　
　　6、移植試管苗
　　當(dāng)蘭花苗長(zhǎng)出3～4片葉．具3～4條根后，可進(jìn)行移植。移植之前應(yīng)打開(kāi)瓶蓋，使之逐漸適應(yīng)新的環(huán)境，然后從試管中取出幼苗，用自來(lái)水輕輕沖洗，把附著在幼苗上的培養(yǎng)基等雜物沖洗干凈，然后移植于培養(yǎng)土或蛭石等基質(zhì)中，放在溫室中培養(yǎng)。

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□ 墨蘭 2008-6-30

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