葉片培養(yǎng)

2010/12/15 20:08:40

葉片培養(yǎng)可能是產(chǎn)生原球莖最有希望的方法，可取帶腋芽的花梗，用水沖洗后，置于10％漂白粉溶液中，表面滅菌20分鐘，除去苞葉，再在5％漂白液中滅菌3分鐘，用無菌水沖洗干凈，接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，置于室溫23～24℃和每日16小時(shí)500勒克斯光照條件下誘導(dǎo)產(chǎn)生原球莖后，進(jìn)而分化出葉片。培養(yǎng)基可用VW，附加CM20％、蔗糖2％～3％、瓊脂1％的培養(yǎng)基。或者不用CM而加6-芐基嘌呤5．0毫克／升也可以。然后取其展開葉片最上部先端、中央或基部，切成6～8毫米大小，接種于Kyoto改良培養(yǎng)基，加復(fù)合肥料3500毫克／升、肌醇100毫克／升、煙酸1毫克／升、鹽酸硫胺素1毫克／升、萘乙酸1毫克／升、腺嘌呤10毫克／升、BA10毫克／升，蔗糖改為20克／升，瓊脂10克／升，置于25C恒溫和每日16小時(shí)500勒克斯光照條件下培養(yǎng)，約經(jīng)40～60天后即可得到原球莖，再經(jīng)繼代培養(yǎng)，即可獲得原球狀的球狀體。繼代培養(yǎng)既可用Kyoto培養(yǎng)基進(jìn)行固體培養(yǎng)，也可用VW培養(yǎng)基加20％CM，并除去蔗糖進(jìn)行液體振蕩培養(yǎng)。形成的原球莖球狀體只需在簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基上進(jìn)行靜置培養(yǎng)，2～3個(gè)月后萌芽出葉，再轉(zhuǎn)到添加10％香蕉汁的Kyoto培養(yǎng)基上，經(jīng)數(shù)月后即可得到可移植的大苗。

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