組織培養(yǎng)的培養(yǎng)技術(shù)

1、取材植物體的各個(gè)部位皆可培表，但根據(jù)需要培養(yǎng)的難易，對(duì)不同植物則有所區(qū)別。莖尖是利用最多的部位。根據(jù)不同的需要還可取葉片、花、花�；蚧üＲ秆�、根、莖等。通常應(yīng)改初生幼嫩的材料，其分生能力強(qiáng)。
2、消毒
組織培養(yǎng)用的材料大多取自田間，帶有大量雜菌，這是無(wú)菌培養(yǎng)的大障礙，為此，需嚴(yán)治地進(jìn)行消毒滅菌。取材后先將泥土洗凈，再在自來(lái)水中沖洗10～2O分鐘，然后轉(zhuǎn)入無(wú)菌條件進(jìn)行消毒。
3、接種培養(yǎng)
接種的培養(yǎng)材料在消毒濾紙上切成所需大小，通常約幾毫米大小，中國(guó)蘭花莖尖應(yīng)在0.2毫米以下，為此，需在解剖鏡下操作。工具用完即應(yīng)在95%灑精中沾一下，然后用火焰消毒法消毒，避免工具帶菌造成交叉污染。材料接種后將培養(yǎng)瓶移入培養(yǎng)室，放在培養(yǎng)架上進(jìn)行培養(yǎng)。
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│組織│消毒順序│備注│
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││消毒前│消毒│消毒后││
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│種子│純酒精中浸10分│10％次氯酸鈣浸│九菌水洗3次，在│用幼根或幼芽│
││鐘，再用無(wú)菌水漂│20～30分鐘，再用│無(wú)菌水中發(fā)芽。或│來(lái)產(chǎn)生愈傷組│
││洗│1％溴水浸5分鐘│用無(wú)菌水洗5次。│織│
││││在濾紙上發(fā)芽││
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│果實(shí)│飩酒精迅速漂洗│2％次氯酸鈉浸10│無(wú)菌水反復(fù)沖洗，│獲得無(wú)菌苗│
│││分鐘│再剖除種子或內(nèi)部││
││││組織││
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│莖切段│自來(lái)水洗凈，再用│2％次氯酸鈉浸15│無(wú)菌水洗3次│直立在瓊脂培│
││沌酒精漂洗│一30分鐘││養(yǎng)基上或切取│
│││││出組織進(jìn)行培│
│││││養(yǎng)│
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│貯藏器官│自來(lái)水洗凈│2％次氯酸鈉浸20│無(wú)菌水洗3次、濾│從消毒材料向│
│││～30分鐘│紙吸干│都取出組織來(lái)│
│││││培養(yǎng)│
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│葉片│自來(lái)水洗凈，吸干，│0.1％氯比汞浸1│無(wú)菌水反復(fù)沖洗，│選用嫩葉，葉│
││再用純酒精漂洗│分鐘或2％次氯酸│濾紙吸干│片平放在瓊脂│
│││鈉浸15一20分鐘││上，或葉片插│
│││││在瓊脂中│
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(王懷宇)

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