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新幾內(nèi)亞鳳仙的組織培養(yǎng)
鳳仙是鳳仙花科鳳仙花屬多年生常綠草本植物。新幾內(nèi)亞鳳仙是鳳仙花家族中的一個新品種。它花色豐富，四季開花，花期長，葉色獨具特色，作為周年供應(yīng)的時尚盆花，日益受到了人們的青睞。它的傳統(tǒng)繁殖方法是通過播種繁殖，但播種繁殖需要恒定的溫度，而且種子價格比較昂貴，發(fā)芽率低。近年來，用無性繁殖，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，既可以在短期內(nèi)取得大量的優(yōu)質(zhì)脫毒苗，又可避免因常規(guī)無性繁殖而導(dǎo)致的種性退化。具體可用新幾內(nèi)亞鳳仙的莖段作為外植體，對其進行離體快速繁殖。
材料與方法
試材處理
從新幾內(nèi)亞鳳仙植株上剪取帶有腋芽的嫩梢，去掉葉，先用自來水沖洗10分鐘，再用洗潔劑溶液洗滌1－2次。在無菌條件下，依次用70%的酒精浸泡30秒鐘，2%的次氯酸鈉浸泡12分鐘，無菌水沖洗3－5次。最后將處理好的嫩梢切成每個節(jié)間約0.5cm長的帶芽莖段接種在預(yù)制好的初代培養(yǎng)基上。
培養(yǎng)條件
分化培養(yǎng)基的選擇 以MS作為基本培養(yǎng)基，分別設(shè)置BA0.5、1.0、1.5、2.0 mg /L,NAA0.2、0.4、0.6、0.8mg/L各4種濃度，共16個組合。篩選分化培養(yǎng)基中BA和NAA最佳組合，3次重復(fù)。各培養(yǎng)基組合均加入蔗糖3%－4%，瓊脂6－8g，Ad30mg/L，調(diào)PH值為5.8。
生根培養(yǎng)基的選擇 以MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置IBA0.3、0.6、0.9、1.2、1.5mg/L5種濃度，摸索最佳生根條件。各培養(yǎng)基均加入蔗糖2%－2.5%，瓊脂6－8g，調(diào)PH值為5.8。
繼代培養(yǎng)
新接的外植體約30天萌發(fā)成苗，苗高2－3cm時，將小苗剪成0.5cm長帶芽莖段，放入分化培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)。
生根培養(yǎng)
小苗高3cm左右時，從基部剪下，接種于生根培養(yǎng)基上，進行生根培養(yǎng)。
小苗移栽
小苗生根培養(yǎng)根長達2cm時，進行移栽，先移入溫室中煉苗1－2天，溫室中培養(yǎng)2－3周后上盆。
結(jié)果與分析
不同濃度的BA和NAA組合對新幾內(nèi)亞鳳仙分化出苗的影響
以MS作基本培養(yǎng)基，4種濃度BA和4種濃度NAA組合，對新幾內(nèi)亞鳳仙出苗影響見表1。
結(jié)果表明：芽的增殖和嫩梢的增長不僅取決于BA、NAA的絕對數(shù)量，而且取決于二者相對比例。濃度最大BA/NAA條件下，繁殖系數(shù)17達最大，而且嫩梢生長度也達到最大1.23，濃度最小BA/NAA條件下，繁殖系數(shù)、嫩梢長度之比為10/0.67，二者絕對值處于中間狀態(tài)。綜合芽的形成和嫩梢生長兩種情況看：高濃度的BA與NAA配合時，嫩梢生長較正常，平均株高1.09cm，增殖倍數(shù)為14，較低濃度的BA與NAA配合時，繁殖系數(shù)為8.9，平均株高為0.68cm，長勢不良，實驗條件下以BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L效果為最佳。
不同濃度的IBA對生根的影響
以MS為基本培養(yǎng)基，5種濃度IBA條件下生根效果見表2。
結(jié)果表明：開始生根天數(shù)隨IBA濃度加大而縮短，IBA濃度從0.3－0.9mg/L范圍內(nèi)，隨濃度加大，生根率、每株根數(shù)增加，超過0.9mg/L，生根率下降。且多形成粗大根，產(chǎn)生愈傷組織或從愈傷組織上再生根。實驗條件下，以0.9mg/L生根效果最好，生根較快，根系生長正常，根數(shù)較多。
小苗移栽
已生根小苗經(jīng)20天，待根長達2cm時，取出試管苗，洗去根上瓊脂，移至透水通氣的蛭石中，先在培養(yǎng)室中溫度20℃-25℃，相對濕度65%-75%條件下培養(yǎng)2-3周，然后移至散射自然光下煉苗1-2周，最后上盆進入溫室，成活率可達95%以上。這期間除了注意保溫保濕外，土壤濕度不宜太大，溫度以23℃-25℃為好，注意采用殺菌劑保護，避免幼苗腐爛死亡。
結(jié) 論
MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+Ad30g/L+蔗糖3%+瓊脂8g/L,調(diào)PH值為5.8是新幾內(nèi)亞鳳仙莖段培養(yǎng)較為理想培養(yǎng)基。繼代培養(yǎng)天數(shù)約為30天左右，繁殖系數(shù)可達17，嫩梢生長正常。
在MS+IBA0.9mg/L+蔗糖2.2%+瓊脂7g/L，調(diào)PH值為5.8的培養(yǎng)基上，新幾內(nèi)亞鳳仙試管苗生根效果較好，生根率可達95.4%，根系發(fā)達，植株生長旺盛。
生根兩周后的試管苗尚需煉苗2－3天，經(jīng)培養(yǎng)室移植培養(yǎng)2－3周，自然光下1－2周煉苗可上盆入溫室，成活率達95%以上，小苗成活關(guān)鍵是基質(zhì)選擇及溫、濕度控制。
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