花卉繁殖綜述(四)

培養(yǎng)基的種類很多，采用哪一種培養(yǎng)基，對(duì)于培養(yǎng)是否成功有很大的關(guān)系，在1950～19艦?zāi)瓿醭２捎肳hite培養(yǎng)基，但后來(lái)有很多新的培養(yǎng)基，其中Ms是Murashige和skoog1962； ER是Erikssonl965； B5是Gambor等1968； SH是shenk和Hildebrandt l972； HE是Heller1953提出來(lái)的，見(jiàn)表1表2。

這些培養(yǎng)基中MS培養(yǎng)基應(yīng)用最廣泛。ER培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基相似。B5培養(yǎng)基在愈傷組織和懸浮培養(yǎng)方面做了不少試驗(yàn)，對(duì)有些植物很適合，SH培養(yǎng)基與B5相似。HE培養(yǎng)基為歐洲許多實(shí)驗(yàn)室所用，但礦物鹽濃度稍低，應(yīng)用范圍不太廣。在花卉組織培養(yǎng)中用MS培養(yǎng)基最多。

引培養(yǎng)條件

培養(yǎng)條件，按培養(yǎng)對(duì)象的種類不同而有所不同，溫度條件一般在23～26℃左右的恒溫條件下。光照條件對(duì)器官形成有作用，一般范圍是1000～3000勒克司，每日12～16小時(shí)，高于3000勒克司有強(qiáng)烈抑制作用。培養(yǎng)室要求清潔衛(wèi)生，減少污染。

2.花卉組織培養(yǎng)的途徑

在花卉組織培養(yǎng)實(shí)踐中，用植物的組織或細(xì)胞培養(yǎng)成植株，也就是試管培養(yǎng)，可以通過(guò)三條途徑。

通過(guò)器官發(fā)生

通過(guò)由培養(yǎng)的組織，產(chǎn)生芽及根，器官發(fā)生由于培養(yǎng)材料的不同又可分為兩方面：一是培養(yǎng)花卉植物的莖尖產(chǎn)生大量芽，再將芽分離轉(zhuǎn)移培養(yǎng)成植株；二是培養(yǎng)花卉植物器官外植體產(chǎn)生不定芽，發(fā)育成植株。

通過(guò)煎傷組織分化成株

將花卉植物體的一小片組織培養(yǎng)成愈傷組織，再誘導(dǎo)分化成芽和根，成為完整植株。

通過(guò)胚狀體發(fā)主

由培養(yǎng)的植株產(chǎn)生愈傷組織，再通過(guò)懸浮培養(yǎng)，或直接產(chǎn)生大量的胚狀體，再發(fā)育成完整植株。

3．花卉組織培養(yǎng)的操作方法

花卉組織培養(yǎng)的操作可分為培養(yǎng)基配制、消毒滅菌、接種、培養(yǎng)等幾方面。

培養(yǎng)墓配制

選定培養(yǎng)基以后，需把大量元素、微量元素、有機(jī)物都配成母液，擴(kuò)大倍數(shù)為稀釋液，貯存?zhèn)溆�。使用時(shí)，根據(jù)所需配制的量，在稀釋液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等，再加鐵鹽加硫酸亞鐵配制成螫合鐵）成營(yíng)養(yǎng)液，然后吸取需用量，加入培養(yǎng)基中，再測(cè)其酸堿度，最后加瓊脂煮沸后分裝入三角瓶或試管中，封口待用。

消毒滅菌

消毒滅菌非常重要，關(guān)系到組織培養(yǎng)的成敗。污染的途徑是器皿、用具、材料的帶菌，以及接種室的空氣、墻壁、地板等的不清潔，故必須針對(duì)所提及的幾方面，進(jìn)行嚴(yán)密的消毒滅菌。

①培養(yǎng)基消毒：將配制分裝好培養(yǎng)基的三角瓶或其他容器放入高壓滅菌鍋中，在15磅／英寸2的壓力下，經(jīng)20分鐘高壓滅菌即可。

②器皿與用具的消毒：接種用具及玻璃器皿、洗滌材料用的無(wú)菌水，用牛皮紙包好后和培養(yǎng)基一起放在高壓滅菌鍋中消毒滅菌。

③接種室消毒：接種室的地面及墻壁，在接種前后均要用1 ：50的新潔爾敏濕性消毒，每次接種前還要用紫外線燈照射消毒30～60分鐘，并用70%的酒精，在室內(nèi)噴霧，以凈化空氣，最后是超凈臺(tái)臺(tái)面消毒，可用新潔爾敏擦襪及70%酒精消毒。

④材料處理及消毒：花卉組織培養(yǎng)取嫩莖、花托、葉柄、葉片均可，取得材料后，需先清理，去掉多余部分，然后沖洗、洗滌劑洗滌、漂清后放入接種室或超凈臺(tái)上，用70％的酒精浸泡半分鐘，進(jìn)行表面消毒，再在10％的漂粉溶液中消毒10分鐘左右，取出后用無(wú)菌水沖洗4～5次，即可接種。一般材料的選擇以幼嫩部分為好。草花用嫩莖、花托為好；球根花卉用莖頂、鱗莖盤、鱗葉等為好

接種

接種用的鉗子、解剖刀、接種針等均需在火焰上消毒后用，用后再消毒。將消毒好的材料置于培養(yǎng)皿中，用解剖刀切去其邊緣，再切成小塊接種在培養(yǎng)基上，使組織塊與培養(yǎng)基密合，不得將材料陷于培養(yǎng)基中，接好后隨即將瓶口封好待培養(yǎng)。

培養(yǎng)

接種完畢后即可置于培養(yǎng)室，在恒溫、加光條件下進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)一段時(shí)間后，根據(jù)情況將材料從誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)到分化培養(yǎng)基，最后轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上。

試管苗移栽

試管苗發(fā)根后，必須隨即轉(zhuǎn)移到栽培基質(zhì)中去，這種基質(zhì)可以用培養(yǎng)土、蛭石、珍珠巖等配成。將試管苗從瓶中耿出，洗去殘存的培養(yǎng)基，移植到準(zhǔn)備好的基質(zhì)中去，隨即用細(xì)噴壺噴水后加玻璃或塑料罩，3～4日內(nèi)不必澆水，以后澆些清水，1周后見(jiàn)苗已挺直，可去罩澆培養(yǎng)液，以利生長(zhǎng)，2～4周后可進(jìn)行常規(guī)栽培。

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