大花蕙蘭組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)

一、啟動(dòng)誘導(dǎo)母株的選擇。母株的選擇應(yīng)遵循三項(xiàng)基本原則：1.整個(gè)群體表現(xiàn)出該品種的典型性狀；2.群體生長(zhǎng)發(fā)育良好，沒(méi)有普遍發(fā)生特定病害浸染，特別是東亞蘭花葉病毒，齒舌蘭輪斑病毒；3.在符合上述條件的群體中選擇性狀優(yōu)異的健壯單株作母株。外植體處理。選擇葉片未完全展開(kāi)的肥壯營(yíng)養(yǎng)芽為外植體，先剝?nèi)?～3片外層葉片，再手持蘭花葉芽梢，切去基部勝物及損傷、老化組織，最后逐層剝凈外層葉片，直至有小頂芽和小側(cè)芽露出。然后在超凈工作臺(tái)上先用70%的酒精浸泡外植體30秒，用無(wú)菌水沖洗后，再放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡8分鐘左右，再用無(wú)菌水沖洗3～4次，然后在無(wú)菌接種盤上小心切下頂芽和側(cè)芽。圓球莖誘導(dǎo)與馴化。將切下的頂芽和側(cè)芽插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，基部向下，稍稍露出芽尖。然后將其置于培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng)，光照強(qiáng)度1000～1500勒克斯，光照時(shí)間每天14小時(shí)，培養(yǎng)溫度25℃左右。10天后芽開(kāi)始萌動(dòng)，誘導(dǎo)率在85%以上。在圓球莖的誘導(dǎo)過(guò)程中，有80%左右的芽萌發(fā)后很容易長(zhǎng)成小苗。誘導(dǎo)30天后，待小苗長(zhǎng)至4厘米、基部膨大時(shí)，將苗切離基部，并將膨大基部縱切成厚3～4毫米的薄片，切口向下重新放入相同的新鮮培養(yǎng)基中，30～35天從下端切口部位可長(zhǎng)出類似愈傷組織的圓球莖，其中頂芽誘導(dǎo)率最高，誘導(dǎo)速度也最快，側(cè)芽次之。
　　二、繼代增殖和幼苗分化將圓球莖接種于繼代培養(yǎng)基中，然后將其置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25℃左右，光照強(qiáng)度3000勒克斯，光照時(shí)間每天10小時(shí)。每45～50天繼代一次，增殖倍數(shù)可在10倍以上。繼代增殖初期用濃度為1.5×10-6至2×10-6的6-BA可以較快地積累材料，隨著繼代次數(shù)的增加，特別是15代以后或變異株開(kāi)始出現(xiàn)后，只能用濃度為0.5×10-6至1.5×10-6的6-BA，并在生產(chǎn)中及時(shí)淘汰變異的圓球莖。變異的圓球莖表面只是光滑一片，沒(méi)有芽尖，不能分化出芽苗。當(dāng)圓球莖繼代到所需數(shù)量時(shí)，直接將完整的圓球莖轉(zhuǎn)移到新鮮的增殖培養(yǎng)基中，不要縱切分割，也不要切除芽尖，讓圓球莖表面的芽尖直接分化萌發(fā)為小苗。

　　三、生根與煉苗當(dāng)苗長(zhǎng)至3厘米高、有2～3片葉時(shí)，即可將苗小心切離基部，轉(zhuǎn)入壯苗生根培養(yǎng)基中，然后將其置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25℃～28℃，光照強(qiáng)度5000～6000勒克斯，光照時(shí)間每天12小時(shí)，20天左右開(kāi)始生根，35天可進(jìn)行煉苗。大花蕙蘭瓶苗移栽前先移入遮陽(yáng)棚內(nèi)，在自然散射光下，光照時(shí)間每天8～12小時(shí)的環(huán)境中放置15～20天，可明顯提高瓶苗的質(zhì)量和栽植成活率。當(dāng)瓶苗葉色濃綠、葉片堅(jiān)挺、植株健壯時(shí)，即可出瓶移栽。

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□ 植物工廠 2010-12-15

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